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小鼠腹水可作为多克隆和单克隆抗体的来源 砌 · w．Mahana等 锋 摘耍 用简单改进的Krpis等的方法．可从小 克隆抗体能直接从腹水 胞中获得。 鼠得到大量的多克隆抗卵清蛋白抗体。另外用腹水中的细 胞生产单克隆抗体．给卵清蛋白高免的BALB／c小鼠连续 材料和方法 夕 注射异十八烷 抗原和不分泌抗体的骨髓瘤细胞系。10-25 试 剂 用磷酸钾缓冲盐 水 (PBS)及含 氓 天后产生的腹水中有抗卵清蛋白抗体活性。从腹水收集细 膳．洗涤后与聚乙二醇融合以产生单克隆抗体。经两次融 0．1％吐温2O (v／v)的PBST和含 0．5％ 明 合后获得大量抗卵清蛋白的单克隆抗体．此法简单、重复 胶 (w ／v)的PBSTGf仁缓冲液 。过氧化物酶 腹 一性好。1只小鼠可进行多次融合。并能用腹水中B细强代 标记的山羊抗鼠1g来 自Bikad。异十八烷 (2， ，删 替最常用的脾脏B细胞． 6，10，14，四甲基一十五烷)和2，2一叠氮一双 用小鼠大量生产多克隆血清受血液容量 (3乙基苯噻嗪一6砜)(ABTS)来 自Sigma。 的限制，关于免疫小鼠诱生腹水的方法有过 小 鼠 BALB／C系成年鼠 (12～16周 许多报道，这些方法都昆腹腔内单独注射或 龄)来 自本实验室。 ／与细菌、或 ／与异十 ／『烷同时注射完全或不 抗 原 自然卵 清 蛋 白 (NOA)组份 完全福氏佐剂等。最近，Kurpisz等 介绍 了 Ⅶ来 自Sigma，热变性卵清 蛋 白 (DOA) 一 种大量生产多克隆抗血清的方法，小 鼠用 用PBS配成，每ml溶液含卵清蛋 白0．5rag， 抗原(AG)免疫 3次，异十八烷注射 2次 ，再 经100℃加热3O分钟后 以10000×g离心 15分 注射不分泌抗体的肿瘤 的浆细胞瘤细胞系 1 钟，收集上清。 次 以诱导腹水 的生成。 免疫方法和腹水生产 6组BALB／C小 过去生产单克隆抗体 (MAb)的细胞多 鼠(5～7只／组)皮内注射OA或DOAS0~g／ 来源于脾细胞。其方法已作过一些改进，如 只 (用 0．5mlPBS配成并与等体积 佐 剂 混 采用消化道相关的淋 巴组织，即肠系膜或周 合)，其中2组除首免改用福 氏完 全 佐 剂 围的肠淋 巴结。其 目的是诱导免疫系统产生 (CFA)，以后用福氏不完全佐 剂 (IFA) 限定的同型免疫球蛋白。~nlgA或lgG。本研 外，均按Kurpisz等的方法进行免疫。 究对 Kurpisz的方法作 了简单改进，用免疫 另外 4组按不 同的时间，用同一剂量的 小鼠产生含多克隆抗卵清蛋白的腹水，而单 Ag经腹腔注射免疫，但首免时与氏CFA、以 年猪相似。所有用gⅡ免疫接种的仔猪 在 用 性。因为补体几乎以宿主血清的一种成分存 PRy致死性攻击中均存活。 在，所 以抗g1t抗体可能与补体共 同作 用 诱 在被试的所有病例中，病毒中和作用需 发对病毒攻击的保