实验十 根系活力的测定-α-萘胺氧化法.pptVIP

* * 实验十 根系活力的测定 实验十 根系活力的测定 (α－萘胺氧化法) 根系是植物吸收水分和矿质元素的主要器官。根系活力影响着根对水分、矿质元素 的主动吸收。本实验的目的在于掌握一种常用的根系活力测定的方法和原理。 α－萘胺氧化法 【实验原理】 α－萘胺 （无色） 吸附在根系表面 被根氧化 α－羟基－1－萘胺 （红色） 4. α-萘胺在空气中会被自动氧化 1. 根表红色越深→根活力越强（定性测定）（2－3天） （酸性） 3. α-萘胺 + 对氨基苯磺酸 + 亚硝酸盐 → 生成红色偶氮染料 →比色（定量测定） 2. 原有α-萘胺 –剩余的α-萘胺=被氧化的α-萘胺量（代表根系活力强弱） 洗净 加入 α－萘胺 25ml A处理：取2g根 三角瓶中 吸干 磷酸缓冲液 25ml 根浸没 静置5min B处理： 三角瓶 加入 α－萘胺 25ml 磷酸缓冲液 25ml 静置5min 2. 各取2ml溶液至25ml容量瓶 加水10ml 加 对氨基苯磺酸 1ml NaNO2 1ml 混匀 转红色 定容至25 ml 室温25min后 分光光度计510nm读A值（始点数值） 【实验步骤】 取2只100ml三角瓶，1只作以下A处理，1只作B处理 3. 取完2ml后，2只三角瓶立即置25℃恒温箱中避光保温（氧化）60min后，同2测定 2. 各取2ml溶液至25ml容量瓶 加水10ml 加 对氨基苯磺酸 1ml NaNO2 1ml 混匀 转红色 定容至25 ml 室温25min后 分光光度计510nm读A值（终点数值） A处理： 始点数值 － 终点数值 ＝ 总氧化数值 B处理： 始点数值 － 终点数值 ＝ 自动氧化数值 4. 计算 被氧化的α－萘胺 量（μg /g FW·hr) = (总氧化浓度－自动氧化浓度）×25ml / 2g · 1hr