在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时检测大豆不同部位的4种植物激素.pdfVIP

第42 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究报告 第12 期 2014 年12 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1743 ~1749 DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.140705 在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时检测 大豆不同部位的4 种植物激素 1 2 1 *1 1 1 1 贾鹏禹 曾明飞 冯乃杰 郑殿峰 孙福东 孙 蕊 李朝阳 1 2 (黑龙江八一农垦大学,大庆 163319) (赛默飞世尔科技(中国)有限公司,上海201023) 摘 要 采用双三元液相色谱(Dual gradient liquid chromatography,DGLC)建立了在线固相萃取技术与电喷雾 串联质谱联用方法(Online SPE DGLC-ESI MS/ MS),并成功应用于实际样品检测。 本方法同时检测大豆不同 部位中的4种酸碱性植物激素(赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)和脱落酸(ABA))。 通过考察固 相萃取富集柱、分析色谱柱、流动相对植物激素的保留和选择性的影响,获得较高的灵敏度、回收率、稳定性及精 密度。 大豆样品经液氮低温研磨,以80％甲醇溶液提取,再经离心稀释过滤后,进样分析。 进样后样品经在线 固相萃取Hypersep Retain AX柱洗脱保留,目标分析物依次转移至分析柱Acclaim PA2色谱柱,并以0.1％甲酸 和甲醇溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用选择反应监测离子模式(SRM)同时采集正负离子通道进行定性分 析,基质标准曲线外标法进行定量分析,GA3, IAA,ZT 在 0. 1 ~50 μg/ L 范围内线性良好,检出限为 0.0002 μg/ g;ABA在0.5~50 μg/ L的范围内线性良好,其检出限为0.0010 μg/ g。 以0.8,4.0和40 μg/ L分别 为低、中、高浓度考察4种植物激素的回收率为76.1％ ~93.5％,RSD为0.8％ ~6.0％。 结果表明,籽粒中含有 的ABA浓度明显高于其它部位。 本研究为快速准确地分离和测定大豆不同部位内源激素提供了有效方法。 关键词 内源植物激素;大豆;高效液相色谱-串联质谱;在线固相萃取技术 1 引 言 赤霉素(GA )、吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)和脱落酸(ABA)是4 种重要的植物内源激素,广泛分 3 布在植物体内,对植物细胞的生长、分化、分裂、器官建成、植物的休眠萌发形态反应等都有直接或间接 的调节控制作用,参与植物生命的所有活动[1~3]。 但是,内源激素因其在植物中的含量极低,基质干扰 多,使得农作物内源激素的测定十分困难,因此痕量激素的测定技术已成为制约植物激素学界研究的最 [4] 大瓶颈之一,同时也是分析科学领域的研究热点 。 目前,关于农作物中内源激素测定的文献报道多结合液相色谱技术或液相色谱-质谱联用技术,进 样前几乎均采用固相萃取(SPE)技术去除农作物中复杂基质干扰。 显然,固相萃取技术在复杂基体中 [5,6] 痕量组分分析中处于核心地位,是农作物内源激素测定较为理想的选择 。 已发表的文献报道表明, 其所采用的固相萃取方法处理过程基本上还处在手工操作阶段,存在过程复杂、耗材消耗量大、有毒