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附件2广西医科大学“未来学术之星”大学生课外科研课题基础医学B类立项课题成果论文TNF对胰岛β细胞株NIT-1损伤的拉曼光谱分析作 者： 王言焱 林家伟 张焕威 蒙湛东 文川源学院、专业： 第一临床医学院 临床医学专业年级、班别： O8级5班指导老师（部门）： 邝晓聪 陈相宜（病理生理学教研室）TNF对胰岛β细胞株NIT-1损伤的拉曼光谱分析王言焱1，林家伟1，张焕威1，蒙湛东1，文川源1，邝晓聪2，陈相宜2（1广西医科大学第一临床医学院2008级5班 南宁530021； 2 广西医科大学病理生理学教研室 南宁530021）摘 要目的：探索拉曼光谱在检测胰岛β细胞株NIT-1损伤方面的作用。方法：将NIT-1细胞按5X104个细胞/孔置于24孔培养板，培养48h后，随机分入空白对照组和TNF干预组，应用拉曼光谱技术检测空白对照组和TNF干预组24小时的单个细胞变化。结果：与空白对照组的拉曼光谱比较，TNF干预组的核酸和蛋白质相关的峰值下降，随着干预时间的延长峰值下降幅度越大。结论：拉曼光谱可以检测TNF对胰岛β细胞的损伤，为胰岛β细胞损伤检测体系的建立打下基础。关键词 TNF；胰岛β细胞；拉曼光谱中图分类号：R3TNF beta cell lines of NIT-1 damage of the Raman spectra analysisWANGYanyanLINJianwei ZHANGHuangweiMENGZhandongWENChuanyuanClinical college, Guangxi Medical University，Guangxi, Nanning 530021，P．R．China;Abstract:【objective】: to explore the Raman spectra in detection beta cell lines NIT-1 the role of the damage.【Methods】: will NIT-1 5 X104cells in a cell/hole in training board, cultivate a 24 hole after 48 h, random points into the blank in the control group and TNF intervention group, the application of the Raman spectra gaps in the control group and TNF technical inspection of the intervention group 24 hours of individual cells changes.【Results】: in the control group and blank of the Raman comparison, TNF intervention group nucleic acids and proteins related to the decline, with the peak valueinterventionof prolonged decline. Thebigger the peak .【Conclusion】: the Raman spectra can detect beta cell damage.Key words: TNF; Beta cells; Raman spectra胰岛β细胞的损伤是导致糖尿病的重要因素。对于这种损伤的研究，目前还缺乏实时、动态、迅速的检测手段。众多的文献显示肿瘤坏死因子TNF参与了胰岛免疫性炎症的发病机制，是导致糖尿病胰岛β细胞损伤的重要介质。而糖尿病胰岛β细胞死亡的细胞学过程中会伴随着细胞内大规模生物大分子迁移、重组或者量的改变。拉曼光谱能提供细胞内核酸、蛋白质、脂质含量等大量信息，可在不损伤细胞的条件下实时监测细胞分子结构变化。本实验通过已知的损伤因子作用于胰岛β细胞，分析胰岛β细胞损伤后拉曼光谱的改变，建立拉曼光谱检测体系，为胰岛β细胞损伤检测体系的建立打下研究基础。1 材料与方法1.1主要试剂和材料TNF-α（由课题组提供），NOD鼠胰岛β细胞株NIT-1（由课题组提供），15%胎牛血清的RPMI1640培养液,0.25%胰酶。1.2细胞培养及处理方法1.2.1NIT-1细胞的复苏从低温冰箱中取出细胞从低温冰箱中取出细胞冻存管，迅速放入37℃水浴1-2min，摇动使之快速融化；75%酒精消毒管口后，吸出细胞悬液，注入己加有5一10m1RPMll64O细胞培养液的离心管中，低速离心;弃上清，加入培养液，重复离心洗涤细胞2次；