2018届高三生物一轮复习 第1讲 基因工程讲义 新人教版选修3.docVIP

选修3 现代生物科技专题 第1讲 基因工程 考点一| 基因工程的基本工具 1．基因工程的概念及优点 (1)概念：按照人们的愿望进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术赋予生物以新的遗传特性从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。(2)优点与杂交育种相比：克服了远缘杂交不亲和的障碍。与诱变育种相比：定向改造生物的遗传性状。2．基因工程的基本工具(1)限制性核酸内切酶(简称：限制酶)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。作用：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定两个核苷酸之间的磷酸二酯键。结果：产生黏性末端或平末端。(2)DNA连接酶 (3)载体 ②其他载体：λ噬菌体衍生物、动植 (1)切割目的基因和载体时用同一种限制酶的目的是产生相同的黏性末端。 (2)将一个基因从DNA分子上切割下来需要切两处同时产生4个黏性末端。 1．限制酶(1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称无论是奇数个碱基还是偶数个碱基都可以找到一条中心轴线如以中心线为轴两侧碱基互补对称；以为轴两侧碱基互补对称。(2)切割后末端的种类 2．限制酶和DNA连接酶的关系 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。(2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(3)DNA连接酶起作用时不需要模板。3．载体的作用(1)目的目的基因稳定存在且数量可扩大。可携带多个或多种外源基因。便于重组DNA的鉴定和选择。(2)作为运载工具将目的基因转移到宿主细胞内。(3)利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 视角 1 结合基因工程的过程考查三种操作工具1．(2016·全国丙卷)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了、和三种限制性内切酶的识别序列与切割位点图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的、的切点是唯一的)。 图(a) 图(b)根据基因工程的有关知识回答下列问题：(1)经酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接理由是________________________________________________。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子如图(c)所示。这三种重组子中不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________不能表达的原因是____________________________________。 图(c)(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶常见的有________和________其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是________。【解析】 (1)由题图可知和两种限制性内切酶的共同识别序列是二者切割可以形成相同的黏性末端因此经mH Ⅰ酶切得到的目的基因可以与图(b)所示表达载体被酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中启动子应位于目的基因的首端终止子应位于目的基因的尾端这样基因才能顺利地转录再完成翻译过程即顺利表达。图中甲所示的目的基因插入在启动子的上游丙所示目的基因插入在终止子的下游二者的目的基因均不能被转录因此目的基因不能表达。(3)常见的DNA连接酶有连接酶和T连接酶其中T连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。【答案】 (1) 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端 (2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游丙中目的基因插入在终止子的下游二者的目的基因均不能被转录(其他合理答案可酌情给分)(3)E.coliDNA连接酶 T连接酶 T连接酶(其他合理答案可酌情给分)2．(2012·新课标全国卷)根据基因工程的有关知识回答下列问题：(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段其末端类型有________和________。(2)质粒运载体用切割后产生的片段如下： G……CTTAA 为使运载体与目的基因相连含有目的基因的DNA除可用切割外还可用另一种限制性内切酶切割该酶必须具有的特点是________________。(3)按其来源不同基因工程中所使用的DNA连接酶有两类即________DNA连接酶和________DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是________产物是________。若要在体外获得大量反转录产物常采用________技术。(5)基因工程中除质粒外________和________也可作为6)若用重组质粒转化大肠杆菌一般情况下不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞原因是________________________________________。【解析】 限制性内切酶切割DNA分子形成的末端通常有两种即黏性末端和平末端。为EcoRⅠ之外的其他酶进行切割时应该产生相同的黏性末端。DNA连接酶的来源有两个：一是大肠杆菌二是T噬菌体。反转录是由RNA