2012有机酸工艺学重点答案1.docVIP

代谢控制发酵:用人工诱变的方法，有意识地改变微生物的代谢途径，最大限度地积累产物，这种发酵形象地称为代谢控制发酵，最早在氨基酸发酵中得到成功应用。 促进剂；毒害剂： 从生长角度：营养物质一般可以说是促进剂； 从产酸角度：能提高产酸率的都可以说是促进剂。 注：对生长的毒害剂不一定是产酸的毒害剂。而且许多产酸促进剂正是菌体生长的毒害剂，作用包括抑制过度长菌、调节代谢和改变细胞结构等方面。 种子：将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。 生物量：广义的生物量是生物在某一特定时刻单位空间的个体数、重量或其含能量 。 菌种衰退：菌种在培养或保藏过程中，由于自发突变的存在，出现某 些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象，称为菌种的衰退。 菌种扩培：从少量的微生物原种开始，经过束带繁殖培养，为每次发酵提供相当数量的健壮的菌种培养物。 生理酸性氮：(NH4)2SO4, (NH4)3PO4, (NH4)2HPO4, NH4Cl, (NH4)2CO3等，调节代谢，控制pH 生理碱性氮:NaNO3,KNO3,LiNO3,Ca(NO3)2,Mg(NO3)2等 结晶：是固体物质以晶体状态从蒸汽、溶液或熔融物中析出的过程。 饱和溶液；过饱和溶液：柠檬酸在水中有一定的溶解度，其浓度达到正常溶解度的溶液称为“饱和溶液”，超过正常溶解度则称为“过饱和溶液”。 境界膜：结晶时，紧靠晶粒区域a=1，即浓度=饱和浓度C1，如维持母液的浓度为C(C＞C1),则在晶粒周围形成了一层具有一定浓度梯度的液膜，称为境界膜。 浓缩：柠檬酸水溶液在沸腾状态下使其水分迅速蒸发，以提高溶液中酸的浓度，这一物理过程称为浓缩。 初级晶核：首批形成的晶核或加入的晶种都称为“初级晶核” 次级晶核：后面不论何时形成的晶核都称为“刺激晶核”。 母液：第一次分离柠檬酸结晶后的母液称为一次母液，由一次母液继续浓缩结晶，分离出结晶后的母液称为二次母液。 发酵工程的分哪三部分 上游工程——获得发酵产品的条件 发酵工程 发酵工程——微生物反应过程 下游工程——后处理/提取纯化过程 乙醛酸循环与醋酸发酵柠檬酸途径 柠檬酸发酵的产率 1、无CO2固定反应的产率 合成1分子柠檬酸需要3分子乙酰辅酶A，也就是需要1.5分子的葡萄糖。理论产率为：192 /( 180×1.5) = 71.1% 2、通过 CO2固定反应提供四碳二羧酸 葡萄糖生成柠檬酸的全过程中，在碳平衡方面没有碳原子的损失，在乙酰CoA和草酰乙酸缩合时还从水中引进一个氧原子，总反应式为： C6H12O6+1.5O2→C6H8O7+2H20 可见柠檬酸发酵对糖的理论转化率为106.7%，以含一个结晶水的柠檬酸计为116.7%。 黑曲霉柠檬酸高产菌的生理特征 ①能耐高浓度柠檬酸（15%以上），而不利用和分解柠檬酸。 ②耐高浓度葡萄糖（18-20%）；能产生和分泌大量的酸性α-淀粉酶和酸性糖化酶，糖化酶最适作用pH在4.0~4.6，最适温度为60~65 ℃。 ③能利用淀粉质、糖蜜、葡萄糖母液等原料发酵生产柠檬酸。 ④能抗微量金属离子，如Mn2+、Zn2+、Cu2+。 ⑤在深层液体通风培养时，能形成大量的细小菌球体，极大地降低发酵液的粘度。 柠檬酸提取中草酸的影响 ⑥在以葡萄糖为唯一碳源的合成培养基上，生长不好，生成小菌落，孢子形成能力弱。减弱葡萄糖通过HMP途径（戊糖循环）降解的代谢流。 ⑦在生长、繁殖期，细胞内具有较高水平的氨基酸、NH4+;而蛋白质、核酸水平低。在生长和产酸期，细胞内蛋白质，核酸水平低。 ⑧具有很强的侧系呼吸链活性，此侧系呼吸链不产生ATP。 影响柠檬酸中和操作的因素 1.滤液的质量；2.pH的控制；（3）中和温度；（4）其它阳离子的影响；（5）中和剂质量的影响；（6）搅拌器的作用 柠檬酸钙盐在水中的溶解度性质 柠檬酸钙盐在水中的溶解度较小；并且随温度升高进一步降低。 如果温度升高至95~100℃，Ca（C6H5O7）.4H2O的溶解度可进一步降低为0.578g/L水。钙盐提取法就是利用这种性质。 将溶液加热至沸，使柠檬酸钙盐比较完全沉淀析出，而其它有机酸钙（葡萄糖酸钙、草酸钙）等物质溶解。在溶液中含有PO43-和过量Ca2+时，可促进钙盐沉淀。 柠檬酸钙的溶解度也与酸度有关，pH值降低时溶解度增大。 黑曲霉柠檬酸生物合成途径 黑曲霉利用糖类发酵生成柠檬酸其生物合成途径是，葡萄糖经EMP、HMP途径降解生成丙酮酸，丙酮酸一方面氧化脱羧生成乙酰CoA，另一方面经CO2固定化反应生成草酰乙酸，草酰乙酸与乙酰CoA缩合生成柠檬酸。 (1)生长期与产酸期都存在EMP与HMP途径，前者EMP:HMP=2:1，