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环境工程微生物学 第一篇 微生物学基础 第五章 微生物的生长繁殖 与生存因子 微生物的生长 微生物生长的概念 对微生物一个个体来讲，当同化作用大于异化作用时，个体细胞物质增加，体积增大，这种现象称为生长。个体数目的增加为繁殖。 微生物群体的生长，包括群体细胞物质的增加和个体数量的增加。 　　　　　　　　 测定微生物群体生长的方法 测定微生物的数量 显微镜直接计数 稀释平板计数法 滤膜培养计数法 比浊法 测定微生物的重量 称重法 定氮法 DNA含量的测定 显微镜直接计数 将菌液制成染色涂片，在显微镜下直接计数十个以上视野的菌数，取平均值。根据定量菌液在玻片上均匀涂布所占面积及视野面积，换算出每毫升原菌液中的菌数。 直接计数法方法简单、速度快，但由于计数时活菌和死菌都包括在内，结果偏高。 稀释平板计数法 取定量的稀释菌悬液，用平板法涂布培养。由于一个菌落通常由一个菌体长成，因此可通过计算菌落数而推算出样品中的活菌数。 平板法的优点是测定结果均为活菌数，但结果的获得所需时间较长，而往往因样品菌体分散不充分，使结果偏低。 滤膜培养计数法 用微孔薄膜过滤一定量的气体或水样品，其中的菌体被阻留在滤膜上，取下薄膜进行培养，计算菌落数并求出样品的含菌数。 本方法适用于检测菌数少的样品。 比浊法 由于菌体生长而使培养液产生混浊，用比色计或分光光度计测浊度，以光密度（OD）来表示菌液的浓度。对照标准曲线，可求出菌数。 本方法简便、迅速，但菌体各阶段透光率不同，会导致误差。 测定微生物重量的方法 1、称重法 通过离心或过滤，收取菌体，测出干重，以示微生物细胞的生长量。 2、定氮法 通过测定微生物细胞的含氮量，折算出微生物的蛋白质量，以表示微生物的量。 3、DNA含量的测定，以表示微生物的生长量。 微生物群体生长的规律 单细胞微生物的群体生长特征为指数生长 生长曲线 生长曲线 迟缓期的特点 细胞质均匀 代谢活力很强 蛋白质和RNA含量增加 菌体体积显著增加 形成诱导酶的能力强 对环境的变化敏感 对数期的特点 细胞迅速分裂，菌数成几何级数增加； 世代时间最短，而且恒定； 生长速度最高，而且恒定； 细胞健壮，代谢活力强，全为活菌； 对环境敏感，菌体整齐，生理性状及成分较为一致。 稳定期的特点 菌数达到最高点； 活菌数达到动态平衡； 生长速度降为0。 衰亡期的特点 细胞生长受阻，菌数下降； 菌体出现自溶，解体； 有的可形成芽孢。 微生物的生存因子 环境中的很多因子会影响到微生物的生存。 1、温度 2、pH 3、氧 消毒与灭菌方法 菌种的退化、复壮与保藏 * * 物理法 高热灭菌 巴斯德消毒法 射线灭菌 化学法 重金属盐类 氧化剂 还原剂 酚 乙醇 染料 一、退化与复壮 二、菌种的保藏 1、定期移植法 2、干燥法 3、隔绝空气法 4、蒸馏水悬浮法 5、综合法