(实验诊断学）临床常见病原体检测.doc

临床常见病原体检测 第一节 标本的采集运送、实验室评价和检查方法 一、病原检验标本采集与送检的基本要求 标本的正确采集和运送是实验室取得正确结果的前提。但对标本采集的方法和时间，标本的来源，实验室常不能直接加以控制，因此，临床医师和护士必须对此予以高度重视。细菌检验标本采集与送检的基本原则包括： （一）送检报告单应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。 （二）尽量在抗生素使用前采集标本。 （三）在采集血液，脑脊液，穿刺液等标本时，应严格执行无菌操作，避免杂菌污染。 （四）标本采集后立即送到实验室，床边接种可提高病原菌的检出率。 （五）以拭子采集的标本如咽拭子，伤口拭子及时插入运送培养基送检，应采用吸水性好、不易干燥的材料取样。 （六）混有正常菌群的标本，如痰，尿液，伤口拭子，不可置肉汤培养基送检。 （七）盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。 二、常见病原检验标本的采集送检方法 （一）血液与骨髓 1、通常采血部位为肘静脉，但感染灶附近血管采血，可提高阳性率。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采集血标本。标本采集过程应严格无菌操作。 2、每次采血量为5-10ml，婴幼儿1-5ml，培养基与血液之比以10:1为宜。以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。 3、选择体温上升时采血可提高阳性率。对已用抗菌药物而又不能停药者，应在下次用药前采血。 4、每例至少采血两次，间隔时间据病情而定，以利于提高阳性率和区别感染菌和皮肤污染菌。 （二）尿液 尿液标本的采集应严格进行无菌操作。由于治疗药物多数通过尿液排泄，因此，应在用药前采集尿液，且以晨起第一次尿送检为宜。尿培养送检单上必须注明标本采集方法及抗生素使用情况。 1、中段尿采集：是临床上最常用的方法。采样前须以肥皂水和清水洗净尿道口，排出的尿液前段须弃去，而将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。 2、导尿管采集尿液：可减少污染，但易引起逆行感染，除非必要，须避免用此方法。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用无菌注射器斜穿管壁抽吸尿液，或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。 3、膀胱穿刺采集尿液：病人耻骨上皮肤消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液厌氧菌培养或中段尿采集困难的婴幼儿。尿液标本采集后，应立即送检和处理，耽搁时间不能超过两小时，否则，应置4℃冰箱保存，但最好也不要超过6小时。 (三)痰液 1、自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽， 从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器内送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠液雾化吸入导痰，一般以清晨第一口痰为好。 2、气管镜下采集法、气管穿刺法：可减少污染，但病人有一定的痛苦，不易接受和推广。 3、痰标本采集后应及时送检和处理，最好不超过1小时，室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病菌呈过度生长，而肺炎链球菌，流感嗜血杆菌等的检出率则明显下降。 （四）伤口烧伤创面与脓液 1、无菌生理盐水清洗病灶表面后，用无菌拭子取病灶深部的脓液和分泌物， 立即送检，或置运送培养基内送检。 2、对未溃破的脓肿直接用碘酒，酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检，也可以切开排脓时用无菌拭子采样。 （五）粪便 1、挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约2-3克盛于灭菌容器中送检，也可用拭子挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基或PH7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌的检出率。 2、对不易获取粪便者，如婴幼儿可用直肠拭子采集送检。 三、标本的质量评估标准 标本及送检单上应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况等，无患者信息及标识的不予接收。 标本须及时送检，超过时限的标本不予接收。 送检容器须完整，有容器破损或标本渗漏的不予接收。 标本储存、运送方式不当的，不予接收。 明显被污染的标本不予接收。 标本量明显不足的标本不予接收。 除血培养之外的同一天内重复申请检验的标本不予接收。 四、临床病原体检查方法 其主要手段包括： 直接显微镜检查：重要的基本方法，常作为初步诊断但阳性率相对较低。 特异性抗原检查：可作为早期快速诊断，但特异性是关键。 核酸检查：近年来发展迅速，敏感性和特异性均较好。 病原菌分离培养和鉴定：常为确诊的关键步骤，但常较费时。 血清学检查：通过检测相应的特异性抗体以辅助诊断。 第二节 病原体耐药性检测 一、抗生素治疗的现状和存在的问题 抗生素使用增加，疗效下降 出现难以治