南极假丝酵母脂肪酶B的修饰与改造-2017年11月.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2011 年，第30 卷，第2 期，第243-250 页 Genomics and Applied Biology, 2011, Vol.30, No.2, 243-250 评述与展望 Review and Progress 南极假丝酵母脂肪酶B 的修饰与改造 章素平 柳志强 郑裕国* 浙江工业大学生物工程研究所, 杭州, 310014 * 通讯作者, zhengyg@ 摘 要 南极假丝酵母脂肪酶B 是用途最为广泛的脂肪酶之一，可用于许多有机化合物、医药中间体等的 合成。为了改善南极假丝酵母脂肪酶B 的催化性能，提高其环境适应性，同时提高蛋白的表达量，降低生产 成本，从而使其更适于工业化应用，许多针对酶蛋白分子的修饰及改造方法已在南极假丝酵母脂肪酶B 中 得到大量应用。本文从化学修饰、理性设计和非理性设计3 个方面详细综述了南极假丝酵母脂肪酶B 的修 饰与改造的关键技术，包括定点突变、蛋白质融合、易错PCR 和DNA 改组等，同时也介绍了以上技术在改 良南极假丝酵母脂肪酶B 特性方面的诸多成功实例。 关键词 南极假丝酵母脂肪酶B, 化学修饰, 理性设计, 非理性设计 Research Progress of Modification for Candida antarctica Lipase B Zhang Suping Liu Zhiqiang Zheng Yuguo * Institute of Bioengineering, Zhejiang University of Technology, Hangzhou, 310014 * Corresponding author, zhengyg@ DOI: 10.3969/gab.030.000243 Abstract Candida antarctica lipase B is one of the most widely used lipases, which has been used for the synthe- sis of many organic compounds, and pharmaceutical intermediates. In order to improve the catalytic properties of Candida antarctica lipase B, enhance its environmental adaptability for industrial applications, increase its yield and reduce production costs, many modified methods have been widely applied. This paper elaborates on the tech- nologies for modification of Candida antarctica lipase B from three aspects: Chemical modification, rational de- sign and irrational design, such as site-directed mutagenesis, protein fusion, error-prone PCR, DNA shuffling, and then presents their application and achievements in improving the properties of Candida antarctica lipase B. Keywords Candida antarctica lipase B, Chemical modification, Rational design, Irrational design 脂肪酶(1ipase, EC ) 即三酰基甘油酰基水 脂肪酶比动、植物源脂肪酶的性质更具多样性(如更 解酶，是一种特殊的酯键水解酶，它可以在油水界面 广的作用pH 范围、作用温度范围以及作用底物多样 上催化油脂的水解反应，生成脂肪酸和甘油、甘油单 性等) ，更加适合于工业化生产。因此，微生物是工业 酯或二酯(Jaeger et al., 1994; Joseph et al., 2008) 。脂肪 用脂肪酶的重要来源(Hasan et al., 2006; Salameh 酶通常被用于在非水相体系中催化油脂及其它一些 and Wiegel, 2007) 。其中，南极假丝酵母脂肪酶B 水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯