墨旱莲组分中组织蛋白酶K非活性位点抑制剂研究Studyon-药学学报.PDF

936 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 17, 52 (6): 936 942 旱莲组分中组织蛋白酶K 非活性位点抑制剂研究 1 2 1 1 1 3* 1, 3, 4* 蒋益萍 , 吴岩斌 , 秦路平 , 张巧艳 , 辛海量 , Dieter Bromme , 薛黎明 (1. 中国人民解放军第二军医大学药学院, 上海 200433; 2. 福建中医药大学中西医结合研究院, 福建 福州 350108; 3. 加拿大不列颠哥伦比亚大学, 温哥华 V6T 1Z3; 4. 上海市疾病预防控制中心化学品毒性检定所, 上海 200336) 摘要: 组织蛋白酶K (CTSK) 是抗骨质疏松药物的关键靶标。CTSK 活性位点抑制剂能抑制胶原蛋白降解活 性, 同时抑制CTSK 降解其他蛋白的水解活性, 存在较大的不良反应, CTSK 非活性位点 (exosite) 抑制剂具有抑 制骨胶原降解活性且不影响活性位点 (active site) 的 物活性。本研究通过毕赤酵母表达系统表达出重组CTSK, 进一步通过N 端正丁基琼脂糖凝胶柱和SP-琼脂糖凝胶柱分离, 得到高纯度有活性的重组CTSK 。利用所得CTSK 考察筛选了中药墨旱莲不同提取物及化学成分对CTSK 的胶原降解活性和对CTSK 与Z-FR-MCA 底物结合的抑 制作用, 明确了墨旱莲的正丁醇部位为理想的潜在非活性位点活性部位, 从中提取的墨旱莲皂苷 IX 为潜在的非 活性位点抑制剂。 关键词: 组织蛋白酶K; 墨旱莲; 活性位点抑制剂; 非活性位点抑制剂; 正丁醇部位; 墨旱莲皂苷IX 中图分类号: R285 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 17) 06-0936-07 Study on exosite inhibitor of cathepsin K from Herba Ecliptae fractions 1 2 1 1 1 JIANG Yi-ping , WU Yan-bin , QIN Lu-ping , ZHANG Qiao-yan , XIN Hai-liang , Dieter Bromme3*, XUE Li-ming1, 3, 4* (1. School of Pharmacy, Second Mili tary Medical University, Shanghai 200433, China; 2. Ac ademy of Integrative Medicine, Fuj ian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350108, China; 3. The University of B ritish Columbia, Vancouver V6T1Z3, Canada;