一种大豆snp分型新方法-大豆科学.pdfVIP

第 卷 第 期 大 豆 科 学 ２６ ４ Ｖｏｌ．２６ Ｎｏ．４ 　 　 ２００７年 ８月 Ａｕ． ２００７ 　　 　　 ＳＯＹＢＥＡＮＳＣＩＥＮＣＥ ｇ 一种大豆ＳＮＰ分型新方法 袁翠平，李英慧，刘章雄，关荣霞，常汝镇，邱丽娟 （中国农业科学院作物科学研究所／国家农作物基因资源与遗传改良重大科学工程／农业部作物种质资源与 生物技术重点开放实验室，北京 １０００８１） 摘要 单核苷酸多态性（ ）在大豆基因组中分布广泛， 分型是大豆 遗传作图，关联分 ＳＮＰ ＳＮＰ ＳＮＰ 　 析、分子标记辅助选择等研究的重要技术。本文以 基因开发的 个 为例，介绍了一种 犚犺４ ５ ＳＮＰ 犵 大豆 分型的新方法 片段长度差异等位基因特异性 （ ）。采用 ＳＮＰ － ＰＣＲ ＦＬＤＡＳ－ＰＣＲ ＡＳ－ＰＣＲ 原理，针对某个 位点设计 条相差 的特异引物和 个公用引物， 产物约 或 ＳＮＰ ２ ４－５ｂｐ １ ＰＣＲ １００ｂｐ ，种等位基因型 产物相差 ，在 个特异引物 端第 和 碱基位置分别人为引 １５０ｂ ２ ＰＣＲ ４－５ｂ ２ ３′ ３ ４ ｐ ｐ 入错配碱基来提高ＰＣＲ特异性，通过 ６％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可将纯合和杂合基因型检测出 来。探讨了特异引物浓度和退火温度对Ｒｈ４－１５９２扩增效果的影响，研究表明，可通过调整特异 ｇ 引物浓度和退火温度优化扩增效果。 对 份种质分型结果与 产物克隆测序 ＦＬＤＡＳ－ＰＣＲ １８ ＰＣＲ 法一致，表明本研究建立的ＦＬＤＡＳ－ＰＣＲ法是一种简便、快捷、新型的大豆ＳＮＰ分型方法。 关键词 大豆； ；分型；片段长度差异等位基因特异性 ＳＮＰ ＰＣＲ 　 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） Ｓ５６５．１ Ａ １０００－９８４１２００７０４－０４４７－０７ 　 　 　 　 　 犃犕犈犜犎犗犇犗犉犛犖犘犌犈犖犗犜犢犘犐犖犌犐犖犛犗犢犅犈犃犖 ， ， ， ， ， Ｙ