人类新基因ctrp4转基因小鼠的构建与鉴定-中国试验动物学报.docVIP

脂肪细胞因子CTRP4转基因鼠的构建与鉴定 那达翔，马壮，罗阳，李琦，谭伟峰，王兰兰，张国英，尹昂，黄河，吴晓彤，王露 （北京大学基础医学院卫生部医学免疫学重点实验室，北京大学人类疾病基因研究中心，北京100191） 【摘要】：目的：建立人CTRP4基因的转基因小鼠，为脂肪细胞因子CTRP4的体内功能研究奠定基础；方法：构建人CTRP4的转基因小鼠线性化表达载体，利用显微注射的方法载体注射入小鼠受精卵，从而构建人CTRP4的首建鼠（Founder）与野生型小鼠交配繁殖F1代阳性小鼠，再通过近亲繁殖测交的方法，得到CTRP4转基因纯合子小鼠并通过PCR和western blot 的方法对纯合子小鼠进行鉴定；结果：得到人CTRP4转基因小鼠纯合子小鼠两个品系，western blot鉴定该转基因小鼠多种组织均呈现CTRP4高表达。 【关键词】：CTRP4；转基因鼠；脂肪细胞因子 Establishment of Adipocytokine CTRP4 Transgenic Mouse NA Da-xiang※, MA Zhuang※, LUO Yang, LI Qi, TAN Wei-feng, WANG Lan-lan, ZHANG Guo-ying, YIN Ang, HUANG He, WU Xiao-tong, WANG Lu (Ministry of Health Key Laboratory of Medical Immunology,School of Basic Medical Science,Center for Human Disease Genomics, aPeking University,Beijing100191,China) 【Abstract】: Objective: To establish the CTRP4 transgenic mouse model and investigate the function of the novel adipocytokine CTRP4. Methods: CTRP4 overexpressing vector in pCAGGS was firstly constructed and then microinjected into zygote to establish the founder transgenic mice. F1 heterozygotes were generated by founder mice mating with wildtype mice, and the CTRP4 transgenic homozygotes were generated by F1 littermates. The genotype was confirmed by PCR and test cross method. The expression level of CTRP4 in transgenic mice was detected by western blot. Result: The human CTRP4 transgenic homozygote mice line was established, and the expression level of CTRP4 was confirmed raletively high in detected tissues. 【Keywords】CTRP4; Transgenic mice; Adipocytokine C1qTNF相关蛋白（C1qTNF-related protein，CTRP）隶属脂肪细胞因子家族，现已确定这个家族有15个成员[1]。其中的脂联素已经具有将近20年的研究历史，在肥胖、II型糖尿病发生、胰岛素抑制，以及在由肥胖引起的慢性炎症发生过程中具有重要的作用[2]，目前研究发现，在代谢与炎症的交叉领域中，CTRP家族发挥了非常重要的作用[1]。 CTRP4（C1q TNF-related Protein 4）是CTRP脂肪细胞因子家族成员之一，由本室与国家基因组北方中心利用反向生物学的方法，通过DLR（Dual Luciferase Report assay）平台筛选出的对NF-κB通路具有明显活化作用的一个功能未知的新基因2011年首次在国际上进行了报道。、TNFα的表达，促进STAT3的磷酸化HepG2对化疗药的抵抗，促进细胞的克隆形成[3]。 我们体外研究已经证明具有多种重要功能，进一步研究该分子在体内的生理功能及病理作用是十分必要的。为了更深入研究CTRP4体内的作用和机制，我们构建了CTRP4转基因小鼠，并进行了鉴定，结果表明转基因鼠的构建是成功的。