第三章 重要生物制药制造工艺2幻灯片.pptVIP

生物制药工艺学教学课件 生物工程教研室 刘静霆 第三章 生化药物制造工艺 生物工程教研室 刘静霆 §1 氨基酸类药物 §2 多肽与蛋白质类药物 §3 核酸类药物 §4 酶类药物 §5 糖类药物 §6 脂类药物 §2 多肽与蛋白质类药物 §2 多肽与蛋白质类药物 一、多肽与蛋白质药物概述 二、多肽与蛋白质药物的生产方法 三、重要多肽与蛋白质类药物制备 §2 多肽与蛋白质类药物 在目的物提取时应考虑的方面： ① 溶剂的选择 ② 离子强度 ③ pH ④ 温度 ⑤ 稳定性 ⑥ 提取时间 §2 多肽与蛋白质类药物 3、分离纯化 （1）蛋白质的粗分离---分辨率低 盐析、等电点沉淀、有机溶剂分级分离 （2）蛋白质的精制分离 柱色谱法、密度梯度离心法、电泳法、亲和层析法 多肽合成的主要步骤 氨基的保护和羧基的活化 羧基的保护和氨基的活化 接肽和去保护基 1、基团保护 氨基保护基 苄氧羰基——强酸脱除 叔丁氧羰基（BOC）——三氟乙酸（TFA）脱除 9-芴甲氧羰基（Fmoc）--哌啶-CH2Cl2或哌啶-DMF 脱除 2. 液相合成肽法 阶梯伸长法----合成小肽 混合酸酐法----常用DCC法 (R1CO)2O 活化酯法 H-Gly-OME Z-Leu-Gly-OME 片断缩合法----合成大肽 叠氮法 （三）基因工程法 优点： 1.可生产过去难以获得的蛋白和多肽 2.可深入研究活性物质的生理、生化和结构，扩大应用范围； 3.可发现、挖掘更多内源性生理活性物质 4.可改造和去除内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处； 5.可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。 速效胰岛素 礼来公司，Humulin 30/70(30%常规胰岛素，70%精蛋白锌胰岛素) Humulin 50/50 诺和诺德，Novolin 30/70 Novolin 50/50 Thank You！ 猪胰岛素 牛胰岛素 赖脯人胰岛素（礼来公司、速效Ins） 门冬胰岛素 （诺和诺德公司、速效Ins ） 甘精胰岛素 (安万特公司、长效Ins) 人胰岛素（Insulin） B30 A8 ;A10 ;B30 B28 ;B29 B28 A21 ;B31 ;B32 3D Structure of Insulin 胰岛素二聚体（dimer） 胰岛素六聚体（hexamer ） Ins的性质 目前临床使用的胰岛素来源 动物胰脏来源 ----经动物胰脏提取或适当提纯的猪、牛胰岛素 半合成胰岛素 ----以猪胰岛素为原料，酶修饰后得到人胰岛素 重组DNA技术生产胰岛素 ----重组DNA技术生产人胰岛素、速效胰岛素、长效胰岛素 动物来源的胰岛素（28种） 药品名称 生产企业 药品名称 生产企业 ILETIN I LILLY NPH PURIFIED PORK ISOPHANE INSULIN NOVO NORDISK INC ILETIN II LILLY PROTAMINE ZINC ILETIN I (BEEF-PORK) LILLY INSULIN NOVO NORDISK INC PROTAMINE ZINC AND ILETIN II LILLY INSULIN INSULATARD NPH NORDISK NOVO NORDISK INC PROTAMINE ZINC AND ILETIN II (PORK) LILLY INSULIN NORDISK MIXTARD (PORK) NOVO NORDISK INC PROTAMINE ZINC INSULIN BRISTOL MYERS SQUIBB LENTARD NOVO NORDISK INC REGULAR ILETIN II LILLY LENTE NOVO NORDISK INC REGULAR ILETIN II (PORK) LILLY LENTE ILETIN II LILLY REGULAR PURIFIED PORK INSULIN NOVO NORDISK INC LENTE ILETIN II (PORK) LILLY REGULAR INSULIN NOVO NORDISK INC LENTE INSULIN NOVO NORDISK INC SEMILENTE NOVO NORDISK INC NPH IL