人体解剖生理学实验教案.docVIP

第二部分 基本生理实验操作 ? 神经与肌肉生理 实验一、蛙或蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备 [目的要求] 1．学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。 2．熟悉学习并掌握蛙类坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法。 [基本原理] 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，其离体组织所需的生活条件比较简单，容易维持良好的机能状态。因此蛙类的神经-肌肉标本常用以观察研究兴奋性、兴奋过程、刺激反应的一些规律，以及骨骼肌的收缩特点等。 [动物与器材] 蛙或蟾蜍、两栖类常用手术器械(粗剪刀、手术剪、手术镊、手术刀、手术剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针和玻璃分针2根)、蛙板(木质或硬泡沫塑料)、玻璃板、固定针、锌铜弓、培养皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、任氏液（Ringer`s solution）。 [方法与步骤] (一)标本制备 1.破坏脑脊髓：左手持蛙，用食指下压吻端，拇指按压背部，使蛙头前俯；右手食指沿两鼓膜正中向后触摸，触及一凹陷处，即枕骨大孔。用蛙针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，再向前伸入颅腔，捣毁脑；向后插入椎管，捣毁脊髓。或把铁剪刀插入口裂，沿两眼后缘剪去头，再以蛙针捣毁脊髓。待蛙四肢肌肉紧张性完全消失，即表示脑和脊髓已破坏完全。 2.剥制后肢标本：如果动物个体较大，可将双毁髓的动物腹面向上放入蜡盘中。一手持手术镊轻轻提起耻骨联合上方的皮肤，另一手用手术剪横向剪开皮肤，再剪开体壁肌肉(开口要大)。然后用手术镊轻轻提起内脏，自耻骨部剪断(勿损伤脊神经)。一手轻轻托起蟾蜍后肢，使头部及内脏向下，看清支配后肢的脊神经发出部位，于其前方手术剪横向剪断脊柱。然后再沿脊柱两侧到横向切口剪断体壁，一手用蘸有任氏液的拇指和示指捏住断开的脊柱后端，另一手向后撕剥皮肤并除去断开脊柱以上部位肢体及内脏。如果下肢撕皮困难，可在撕皮至股部时，用手勾住双股中间后再行撕剥。将剥干净的后肢放人任氏液中备用。清洗手及用过的手术器械。 注意：操作过程中不可将剥皮后的标本同皮肤、内脏等弃物放在一起。 3.分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左侧，用左手拇指和示指固定标本的股部两侧肌肉，右手持手术刀，于耻骨联合处向下按压刀刃，切开耻骨联合。然后用手托起标本，剪开两后肢相连的肌肉组织，并纵向剪开脊柱(尾杆骨留在一侧)，使两后肢完全分离。将分开的后肢，一只继续剥制标本，另一只放人任氏液中备用。 4.分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其足底向上，用固定针将标本固定在玻璃板下方的蛙板(木板或硬泡沫塑料板)上。用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经(图2-1)。股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的肌缝，找出坐骨神经。坐骨神经基部(即与脊神经相接的部位)，背部有一梨状肌盖住神经，用玻璃分针轻轻挑起肌肉，便可看清下面穿行的坐骨神经。剪断(或用玻璃分针扯断)梨状肌，完全暴露坐骨神经与其相连的脊神经。再用玻璃分针轻轻挑起神经，自前向后剪去支配腓肠肌之外的神经分支，将坐骨神经分离至胴窝处。取下脊柱端的固定针，保留神经发出部位的一小块脊柱骨，用金冠剪剪去其余部分脊柱骨及肌肉。再用手术镊轻轻提起连有神经的脊柱骨片，将神经移开股骨。 5.游离腓肠肌：一手捏住趾端，另一手用手术镊(尖头镊)在腓肠肌跟腱下面穿线，并用结线扎紧。提起结线，游离腓肠肌。 6.分离股骨头或胫腓骨头：如果所用动物个体小，可分离股骨头。方法是：一手捏住股骨，沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，再用手术剪自膝关节向前刮干净股骨上的肌肉，保留1 cm股骨头并剪断股骨。提起腓肠肌上的扎线，剪去膝关节下部的后肢，仅保留腓肠肌与股骨的联系。 如果所用动物个体大，可分离胫腓骨头。此方法简便而易于操作。即在分离出腓肠肌的基础上，移开腓肠肌，用金冠剪剪去胫腓骨上的肌肉，自膝关节以下保留1 cm长的胫腓骨并剪断后肢，然后自膝关节剪断股骨。 制备完整的坐骨神经—腓肠肌标本应包括：连有坐骨神经的脊柱骨、坐骨神经、腓肠肌、股骨头或胫腓骨头四部分(图2-2)。 [注意事项] 1.制备标本过程中，应随时用林格液润湿神经和肌肉，防止干燥。 2.游离神经时，切勿用玻璃分针逆向剥离，以防损伤神经干，又要避免金属器械对神 经的不必要触碰。 3.避免蟾蜍皮肤分泌物和血液等污染标本，也不能用水冲洗标本。 4.有时标本兴奋性过高，可放置２０min待其稳定后再用于以下实验。必要时可接地予以分流。 ? 实验二、刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系 [目的要求] 1．学习肌肉实验的电刺激方法及肌肉收缩的记录方法。 2．观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。 [基本原理] 腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩