低温对植物光合和根系活力的影响.docVIP

低温对小麦光合和根系活力的影响 学院：农学院 专业：2010级 植物学 姓名：张曦 前言 低温是限制粮食作物生产的主要胁迫因子之一，温度过低，不仅会影响作物生长，而且会直接或者间接减少作物产量，对农业经济产生不利影响。本文主要对小麦进行研究，研究了小麦在低温状态下光合色素的含量[1]、根系总吸收面积和活跃吸收面积以及氯化三苯基氯化四氮唑[4]。研究根系吸收面积[3]的大小也是研究小麦在逆境下的生长的重要方法。TTC是标准氧化还原电位为80mV的氧化还原物质，溶于水中称为无色溶液，但是还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲（TTF），生成的TTF比较稳定，不会被空气的氧自动氧化，所以TTC的还原量能表示脱氢酶活性，并作为根系活力的指标。测定在逆境小麦种TTC还原强度可以研究小麦根系在逆境下活力的变化，也对植物在逆境下的生长研究有重要意义[5]。 材料与方法 2.1 材料 本实验所用的材料是两种小麦样品，一种是常温（10℃）下的小麦幼苗作为低温样品，另一种是在25℃温箱中24h培养的小麦幼苗作为正常样品，两种样品都是由河南科技大学农学院所提供。 光合色素的含量、根系吸收面积以及根系活力的测定 2.2.1光合色素的含量的测定 叶绿素提取：称取剪碎的小麦样品0.2g，分别放入研钵中，研磨成浆，再加入乙醇10ml。静置后过滤到25ml棕色容量瓶中（注意用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后联通残渣一同倒入漏斗中）。 测定：把叶绿体色素提取液倒入比色杯内。以96%的乙醇作为空白，在波长665nm、649nm和470nm下测定光密度。 2.2.2根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定 甲烯蓝溶液标准曲线的制作：取7个试管加入不同浓度的甲烯蓝溶液，测得其吸光度值，然后以甲烯蓝浓度为横坐标，以光密度为纵坐标绘制标准曲线。根据实验结果测得的标准曲线为C=0.0061×A660。 样品测定：取小麦根系用滤纸将水吸干再用排水法在量杯或者量筒中测定其根系体积。把0.0002mol/L甲烯蓝溶液分别倒在三个编号的小烧杯里，每杯中溶液量约10倍于跟的体积，准确记下每杯的溶液用量。然后取根系，每杯中浸1.5min。从3个烧杯中各取1ml溶液加入试管，均稀释10倍，测得其吸光度，查标准曲线，求出每杯浸入根系后溶液中剩下的甲烯蓝毫克数。 2.2.3根系活力的测定 TTC标准曲线的制作：首先制作浓度不同的TTC溶液，然后以空白做对照，在485nm波长下测定其光密度，绘制标准曲线。 实验得出标准曲线为：TTC还原量=417.15×A485 样品测定：称取小麦样根0.5g，放入小试管中，加入0.45TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml，在37℃下暗处保温1h。然后加入1mol/L的硫酸2ml。再把跟取出磨碎，提出TTF。最后用乙酸乙酯定容至10ml，用分光光度计在485nm下比色，记录光密度值。 3 实验结果 3.1低温胁迫对小麦光和色素的影响 实验记录结果如下表： 　 665nm 649nm 470nm 正常（平均值） 1.056 0.652 1.197 低温（平均值） 1.368 0.849 1.36 根据公式计算叶绿体色素含量： Ca=13.95D665 -6.88D649 Cb=24.96D649 -7.32D665 Cx·c=（1000D470 -2.05Ca-114.8Cb）/245 叶绿体色素含量=×1ml/1000ml/L 由上述公式可以计算出叶绿体色素含量如下表： 　 叶绿体a 叶绿体b 胡萝卜素 正常（平均值） 1.281 1.068 0.100 低温（平均值） 1.655 1.397 0.025 由实验结果和图表可知，本实验所用的小麦样品在相对低温下色素含量略 升高，只有胡萝卜素降低 3.2低温胁迫对小麦根系吸收面积的影响 　 编号 光密度 正常 1 0.539 2 0.730 3 0.887 冷冻 1 0.427 2 0.618 3 0.757 根据公式计算： 总吸收面积（m2）=[(C1- C1′)×V1]+ [(C2- C2′)×V2]×1.1 活跃吸收面积（m2）=[(C3- C3′)×V3]×1.1 活跃吸收面积（%）=活跃吸收面积/总吸收面积×100 比表面=跟的总吸收面积/根的体积 由上述公式可得出以下结果，如下表： 　 种类 数值 正常 总吸收面积（m2） 0.08696 活跃吸收面积（m2） 0.01526 活跃吸收面积(%) 17.55% 比表面(m2/ml) 0.43480 低温 总吸收面积（m2） 0.0299