ICR小鼠胚胎成纤维细胞CBPI0077A6MUIEF-CyagenBiosciences.PDF

产品说明书 OriCellTM ICR小鼠胚胎成纤维细胞 （灭活） 货号： MUIEF-01002 目录 产品基本信息 1 产品介绍 1 产品特性 1 处理原则 1 培养器皿包被明胶 2 MEF 的复苏和培养 2 相关产品 4 产品基本信息 产品名称 ICR 小鼠胚胎成纤维细胞（灭活） 货 号 MUIEF-01002 规 格 1 ×106 个细胞/管 冻存代次 P1 保存条件 液氮 警告：产品冻存液中含有DMSO ，具有潜在的生物公害，操作者请谨慎处理。 产品介绍 成纤维细胞是一类主要分泌细胞外基质的细胞。小鼠胚胎成纤维细胞通常用做胚 胎干细胞培养的饲养层细胞。 Cyagen ICR小鼠胚胎成纤维细胞（灭活）（简称MEF ）来源于13.5天的ICR胎鼠 的躯干和四肢，单层细胞培养，培养至第一代经γ-射线灭活后冻存。MEF用于培养小 鼠胚胎干细胞、人胚胎干细胞，维持其未分化状态。 质量控制： • 本产品经过了细菌/真菌，支原体，内毒素检测。 • 本产品还经过细胞复苏活力检测，细胞周期，分化潜能鉴定。 该产品仅提供给进一步科研使用，不可应用于临床治疗等其他方面。 产品特性 • γ-射线灭活处理。 • 能维持小鼠胚胎干细胞、人胚胎干细胞的未分化状态及细胞增殖能力。 处理原则 1. 要在无菌的条件下处理该产品。 2. 在接种胚胎干细胞的前一天复苏MEF 。 CBPI0077A6 MUIEF-01002 Page 1 of 4 培养器皿包被明胶 所需材料 • 明胶溶液 （货号：GLT-11301） 为了使γ射线照射处理的第一代小鼠胚胎成纤维细胞更有效地贴附于培养器皿， 要对培养器皿的表面进行明胶包被。 包被明胶 1. 加适量0.1% 明胶到培养瓶/皿中，能覆盖整个培养瓶/皿底面的量即可。 2. 摇匀液体使其覆盖整个培养瓶/皿的底面。 3. 将铺有0.1% 明胶的培养瓶/皿放置在超净台至少30min 。 4. 30 min后，将明胶吸走弃去，培养瓶/皿即可用于接种细胞。 注意：包被明胶的培养瓶/皿在无菌和明胶不蒸干的条件下，可以在4℃保存两周。 MEF 的复苏和培养 所需材料 • ICR小鼠胚胎成纤维细胞 （货号：MUIEF-01002 ） • ICR小鼠胚胎成纤维细胞完全培养基 （货号：MUXEF-90011 ） 复苏MEF 1. 准备好37℃水浴。 2. 准备好ICR小鼠胚胎成纤维细胞完全培养基，温育到37℃。 3. 在一个15 mL离心管中加入9 mL ICR小鼠胚胎成纤维细胞完全培养基。准备37℃ 水浴。 4. 从液氮罐中取出一管MEF细胞，立即放入-80℃冰箱（目的是让进入冻存管的液氮 稍加挥发）。 5. 在-80℃放置2-3 min后，取出MEF ，迅速放入37 ℃水浴中快速晃动，仔细观察， 直至冻存液完全融解。 注意： ① 尽可能避免水没过管帽，以减少污染的风险。 ② 要快速完成细胞复苏过程，融化过程时间过长，会造成复苏后的细胞活性较差。 6. 用70%-75%酒精消毒冻存管口的外壁。 7. 在超净