LC-5500高效液相色谱仪测定食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠.PDF

北京东西分析仪器有限公司 LC-5500 高效液相色谱仪测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠 苯甲酸、山梨酸和糖精钠是常用的食品添加剂。食品中苯甲酸、山梨酸和糖精 钠的测定有气相色谱法（GC）、薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）；糖 精钠的测定有 GC 法、TLC 法和离子选择电极法（ISE）（1）。TLC 法操作复杂， 仅可半定量分析；ISE 法需特殊设备；HPLC 法可同时测定食品中苯甲酸、山梨酸 和糖精钠。具有方法简便，灵敏度高，选择性好，线性范围宽等优点。 1. 材料与方法 1.1 仪器与试剂 仪器 LC-5500 高效液相色谱仪，具紫外检测器（北京市东西电子技术研究 所）；在线脱气机。 试剂 1.甲醇（CH OH） 色谱纯； 3 2.乙酸铵（NH Ac） A.R.； 4 3.苯甲酸标准储备液（1.0mg/mL） 国家标准物质中心； 4.山梨酸标准储备液（1.0mg/mL） 国家标准物质中心； 5.糖精钠标准储备液（1.0mg/mL） 国家标准物质中心； 6.纯水 。 1.2色谱条件 检测器 UV-Vis，λ=230nm； 色谱柱 C18，250mm×4.6mm，5 μm； 流动相 0.02mol/L 乙酸铵-甲醇= （95+5）； 流 速 1.0mL/min； 进样量 20 μL； 柱 温 室温。 1 北京东西分析仪器有限公司 1.3 方法 在上述色谱条件下，注入 20 μL 苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准混合液（0.04、 0.02、0.04 μg/ μL）。色谱图见图 1 图 1 苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准混合液色谱图 2. 结果与讨论 2.1标准曲线绘制 苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准混合液的配制。吸取苯甲酸、山梨酸、糖精钠标 准储备液，配制浓度分别为 0.0 1、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 μg/ μL 的标准混 和液。按上述色谱条件测定峰面积，并绘制校正曲线。见图 2～4 。由图可见，苯 甲酸、山梨酸、糖精钠校正曲线的线性关系良好（相关系数均大于 0.99900 ）。 2 北京东西分析仪器有限公司 2.2 苯甲酸、山梨酸和糖精钠测定精密度试验 在上述色谱条件下，连续六次吸取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准混和液（浓度 分别为 0.02、0.04、0.04 μg/ μL）20 μL 注入色谱仪，分别绘制色谱图。见图5。 图 5 苯甲酸、山梨酸和糖精钠测定精密度试验色谱图 2.2.1 保留时间测定精密度试验,见表 1。 表 1 苯甲酸、山梨酸和糖精钠保留时间测定结果 保 留 时 间/min 1 2 3 4 5 6 X RSD （% ） 苯甲酸 9.66 9.71 9.73 9.75 9.77 9.68 9.72 0.39 山梨酸 13.95 14.06 14.06 14.09 14.01 13.97 14.02 0.43 糖精钠 17.03 16.74 17.01 17.01 16.89 16.79 16.91 0.74 2.2.2 峰面积测定精密度试验，见表 2 。 表 2 峰面积测定结果 峰面积