人皮肤微血管内皮细胞的分离-中国生物化学与分子生物学报.PDF

中国组织工程研究 第 20 卷 第 51 期 2016 –12 –09 出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research December 9, 2016 Vol.20, No.51 www.CRTER.org ·研究原著· 人皮肤微血管内皮细胞的分离、培养及鉴定 王广宇，王 雨，朱艳萍，康煜冬，王伏声，丁 毅，董 雨，徐旭英(首都医科大学附属北京中医医院疮疡外科，北京市 100010) 引用本文：王广宇，王雨，朱艳萍，康煜冬，王伏声，丁毅，董雨，徐旭英. 人皮肤微血管内皮细胞的分离、培养及鉴定[J]. 中国组织工程研究，2016，20(51):7678-7683. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.012 ORCID: 0000-0002-5389-9000(王广宇) 文章快速阅读： 王广宇，男，1971 年生， 人皮肤微血管内皮细胞的体外培养方法 硕士，副主任医师，主要 0 从事慢性溃疡中西医结 剪碎后采 第 传代-胰 合治疗。 用贴壁法 酶消化法 结论：应用贴壁法，并 皮肤真皮浅 在培养过程中少量短时 层组织 应用胰酶法，可获得大 通讯作者：徐旭英，副主 短时少量应 人皮肤微血管内皮细 传代-反 量高纯度的人皮肤微血 任医师，首都医科大学附 用胰酶法 复贴壁法 管内皮细胞。 属北京中医医院疮疡外 科，北京市 100010 中图分类号:R318 文题释义： 文献标识码:B 内皮细胞：也称血管内皮细胞，通常指衬于心、血管和淋巴管内表面的单层扁平上皮，它形成血管的内 文章编号:2095-4344 壁。它们具有吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织，还参与集体免疫活动功能。 (2016)51-07678-06 微血管 ：一般指毛细血管。毛细血管(capillary)是管径最细(平均为 6-9 μm)，分布最广的血管，它是连 稿件接受：2016-09-17 接微动脉和微静脉的血管。它们分支并互相吻合成网。管壁薄，通透性强，其功能是利于血液与组织之 间进行物质交换。 摘要 背景：目前，国内外研究多采用酶消化法结合免疫磁珠法分离微血管内皮细胞，然而步骤过于繁琐且对 细胞损伤较大。因而，如何简化人皮肤微血管内皮细胞分离、培养，同时又能获得到高纯度的内皮细胞 体外培养方法成为研究热点。 目的：探索一种简便高效的来源于糖尿病患者皮肤微血管内皮细胞的体外培养方法，观察细胞生长状态 并进行鉴定。 方法：利用临床上糖尿病伴足部慢性创面截肢后，肢体近心端皮肤和局部创面周围皮肤真皮浅层组织。 经剪碎后采用贴壁法和短时少量应用胰酶法得到人皮肤微血管内皮细胞，传代时利用胰酶消化法和反复 贴壁法对细胞