鸡传染性支气管炎病毒TA03分离株的鉴定与S1基因的克隆和序列分析.pdfVIP

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集 TA03株S1基因成功的多达29个，所以非糖基化前体的分子量仅有115～ 体pGEX一6P一1对IBV 125 kDa，而成熟蛋白的分子量达180 进行了分段表达，这为对S1基因的进一步研究提供 kDa的原因之 了基础。结果表明IBVTA03株的S1基因的两个片一。由于真核蛋自在大肠杆菌中的表达不能得到正 段在大肠杆菌中都能得到表达，但表达的量不高。这 确的修饰，故本试验得到的融合蛋白较预期的分子 可能大肠杆菌中外源蛋白表达量低、细菌本身的蛋 量稍小一些，但大体上是相符的。 白酶降解作用有关，同时外源蛋白质表达量的多少 3．3 与启动子、起始密码子与SD序列之间的距离、欲表 因的两个片段均具有免疫学活性。由于已知Sl蛋白 达蛋白的分子量大小等因素有关，欲表达蛋白质的 是主要的免疫原，通过体外的大量表达，可考虑用其 分子量越大，表达量越小。因此，如何提高其表达量， 作为抗原，制备抗血清及其单克隆抗体，为进一步研 还需要进一步的探索。 究其免疫功能，研制基因工程苗奠定了基础。 3．2S蛋白的N一糖基化位点(Asn—X--Ser／Thr)参考文献4篇(略) 鸡传染性支气管炎病毒TA03分离株的鉴定 与S1基因的克隆和序列分析 杨杰华，刁有祥#，于申业，刘霞，孟凡磊 (山东农业大学动物科技学院，山东泰安271018) [摘要]本实验对山东省泰安地区某疑似鸡传染性支气管炎病例，无菌采集气管、肺脏、肾脏等组织，接种SPF鸡胚 分离培养病原体。经病毒形态观察、血凝特性试验、动物回归试验等证实，我们分离到一株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)；病毒 中和试验表明，该病毒为一株变异毒株；使用国外发表的针对IBV793／B血清型特异性引物，经RT--PCR方法获得了该毒株 的免疫原基因--SI基因。初步确定该传染性支气管炎病毒变异毒株属于793／B血清型。 [关键词]鸡传染性支气管炎病毒；TA03分离株；s1基因f序列分析 Bronchitis，IB) 鸡传染性支气管炎(Infectious 冠发绀、肌肉震颤，最终导致死亡。剖检主要病变是 是由冠状病毒科(Coronavirdae)冠状病毒属严重的气管炎和胸部两侧肌肉病变[1]。病毒中和试 (Coronavirus)的传染性支气管炎病毒(Infectious验结果表明，该IBV毒株和其它血清型传支毒株之 bronchitis virus，IBV)引起的一种急性高度接触性间没有交叉的血清学关系；其免疫原基因S1的序列 传染 与欧洲17个传支毒株的基因序列之间差异高达 病。自30年代在美国爆发以来，现已成为世界各地 21—25％，属于一种新的血清型，命名为793／B或 流行的重要禽病。IBV是单股RNA病毒，该病毒基4／91。目前，该血清型IBV在西班牙、德国、希腊和 因可因点突变和重组而发生变异，故传染性支气管 墨西哥、荷兰、意大利、泰国等国均有发生和流行，对 炎病毒血清型较多。已知的血清型有以侵害呼吸道 养鸡业危害较大。2002年初，我们对山东省某蛋鸡 为主的Conn、Iowa97、Iowa609、JMK、Florida、场产蛋下降鸡群的疑似传染性支气管炎病例进行了 Arkansas99等和以侵害肾脏为主的M41、Holte、病毒分离，经过病毒形态学观察、血凝特性试验、致 Gray、Australia“T”等。R．E．Gough等(1992)报道鸡胚矮小化试验、动物回归试验等证实我们分离到 了英国一种新的传染性支气管炎。该病可引起蛋鸡 了一株传染性支气管炎病毒。病毒中和试验结果表 产蛋量异常下降，并出现软壳蛋、薄壳蛋等；