桑葚多糖t3分离及秀丽隐杆线虫抗衰老活性研究-天津中医药大学.pdfVIP

第36 卷 第2 期 天津 中医药 大学学报 Ｖｏｌ．36 Ｎｏ．2 ２０ 17 年4 月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｉａｎｊｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Apr．2０ 17 DOI ：10.11656/j .issn.1673-9043.20 17.02.15 桑葚多糖T3-3 分离及秀丽隐杆线虫 抗衰老活性研究* 张培丽，陈雪香，王 群，刘 果，张 泳，杨 异，曹 庸 （华南农业大学食品学院，广州 510642 ） 摘要 ：[ 目的]研究桑葚多糖T2 提取工艺优化，并对其抗衰老活性进行分析。[方法] 以秀丽隐杆线虫为模型，用 寿命、移动力分析、吞咽频率、产卵量和肠脂褐质综合评价不同剂量范围的桑葚多糖（T3-3 ）抗衰老活性。通过正交 和优化实验确定最优提取工艺条件为：提取温度 100 ℃ ，提取时间2 h ，提取次数3 次，料液比1∶30 ，提取率最高达 8.48%。[结果]抗衰老活性研究表明，150 mg/L 的T3-3 能增强秀丽隐杆线虫的抗衰老能力。[结论]该提取工艺 1）延 长了秀丽隐杆线虫的寿命，秀丽隐杆线虫平均寿命延长了10.38%（P0.05 ），最大寿命延长了28.57%（P0.05 ），50% 存活率对应天数延长了0.91%。2 ）秀丽隐杆线虫吞咽频率增加，吞咽频率比对照组高18.78%。3 ）产卵量无统计学差 异。4 ）减少秀丽隐杆线虫肠脂褐质的产生量，比对照组平均荧光强度低 11.14%（P0.05 ），实验末期，对照组的平均 荧光强度增大了12.47%。 关键词 ：桑葚多糖提取工艺；抗衰老活性；研究分析 中图分类号 ：R284 文献标志码 ：Ａ 文章编号 ：１６７３－９０４３（２０１7 ）02－0136-06 秀丽隐杆线虫（简称秀丽线虫）生命周期短，与其 命科学研究所惠赠。大肠杆菌OP50 ，由华南农业大 寿命相关的遗传和环境背景较清晰，非常适合进行 学资环学院惠赠。 [1-2] 衰老干预效果的评价和机制研究 。目前，对秀丽线 1.2 药品与试剂 葡萄糖、无水乙醇、苯酚、硫酸、 虫衰老的研究逐渐超过了果蝇和小鼠，成为抗衰老 硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸氢 [3-5] [6] 研究的首选生物模式 。Chuang 等人 发现灵芝多糖 二钾、胰蛋白胨、琼脂粉、氯化钠、甘油、次氯酸钠、 经TIR-1 受体和MAPK 通道，可以激活寿命相关因 氢氧化钠、考马斯亮蓝G-250 等均为国产分析试 子DAF-16 的表达，大大延长了秀丽线虫的寿命。 剂；DEAE-52 纤维素，英国Whatman 公司，参照说明 根据本课题组前期从对细胞氧化损伤保护作 书进行预处理；3500 Da 透析袋，广州威佳科技有限 用的角度，研究利用桑葚多糖T2 分离纯化得到的 公司；结晶体牛血清白蛋白，美国Sigma 公司。 组分T3-1、T3-2、T3-3、T3-4 的抗氧化性结果，表明 1.3 主要仪器 BinderFD 热风循环烘箱，Binder 公 600 mg/L 的T3-3 对PC-12 细胞氧化损伤具有最强 司；BS200S 电子天平，德国Sartorous ；F-90 粉碎机， [7] 保护作用 。基于前期研究基础，采用秀丽线虫为动 浙江台州粮仪厂；HH-S 数显恒温水浴锅，江苏省金 物模型来探究T3-3 组分的抗衰老活性以确定桑葚