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探索性实验开题报告 空间大小对尼克刹米半数致死量的影响 研究背景 国内外发展 关于半数致死量LD50 1927年，英国生物学家Trevn建议用导致一半动物死亡的剂量来表示药物的毒性大小，并发表于皇家学会杂志，由此确立了半数致死量的基本概念。 现在，半数致死量（median lethal dose， LD50 ） 表示在规定时间内，通过指定感染途径，使一定体重或年龄的某种动物半数死亡所需最小细菌数或毒素量。 在毒理学中，半数致死量，简称LD50 （即Lethal Dose, 50%），是描述有毒物质或辐射的毒性的常用指标。按照医学主题词表（MeSH）的定义， LD50是指“能杀死一半试验总体之有害物质、有毒物质或游离辐射的剂量”。 几十年来，研究人员、统计人员对LD50的测算，从不同角度设计出多种方法，如：寇氏法(Karber，1931)、回归直线法(Berksonl944)、序贯法(DixenMood 1948)、霍恩氏法(Horn，1953)又称目测图解法、改良寇氏法(孙瑞元，1963)、logistic模型法(章元明，1997)、固定剂量法(Fixed doseprocedure，FDP，1984年英国毒理学会提出)等。其中以Bliss创建、后为Fisher、Finney所发展的加权概率单位法(又称B1iss法)在数理上最为严谨精密，成为标准的LD50计算方法。 从20世纪70年代开始，我国的科技人员就开始探讨最科学实用的LD50的测算方法，最初使用坐标纸图解法，以后使用带有常用函数的计算器结合查百分率与概率单位表和加权系数表算出最终结果。随着计算机与统计软件的普及，用计算机程序计算LD50成为最准确、最有效的方法，各种大型统计软件如SAS、SPSS、DPS、R等均应用于LD。的测算，许多研究者也研发了在ExCEL上实现对LD50测算的不同方法。 立论依据 一个新药经过动物实验确证有疗效后,都必须经过一系列的毒性和药理实验证明是否安全,才能推荐到临床试用。临床使用前的毒性实验包括:急性毒性、亚急性及慢性毒性观察。 急性毒性试验往往是以药物对动物(常用小白鼠)的致死量来表示,但是由于个体差异和环境因素任何一种药物对不同个体的小白鼠的致死量是有差异的。 即使采用严格统一的方法和实验条件仍不能取得一致的结果。而实验发现，小鼠放置空间变小，致死量下降。 实验研究目的 通过本实验揭示空间大小对半数致死量的影响规律 实验研究意义 本实验通过研究空间大小对尼克刹米造成实验小鼠半数致死量的影响，为空间大小对半数致死量有影响提供理论依据。从而通过控制空间大小减少影响实验结果的因素，规范半数致死量测定的实验，提高实验结果的准确性。 研究的主要内容及方法路线 通过对尼克刹米半数致死量（LD50）的测定研究空间大小对半数致死量（LD50）的影响。计算半数致死量（LD50）的数值，通过比较实验组和对照组的实验结果来判断空间大小对半数致死量（LD50）的影响。 实验材料及对象 实验器材和药物 BL-420生物机能实验系统、小鼠笼、大鼠笼、托盘、电子称、大镊子、1ml注射器、4号针头、小烧杯； 25%尼可刹米注射剂（0.5g/2ml）、苦味酸 实验对象 小鼠，体重18~22g，雌雄各半，实验前12h禁食，不禁水 实验内容与方法 2.动物分组 雄性小鼠120只，分为实验组和对照组各60只，每组随机分为6组，每小组10只。 3.给药 0.2ml/10g，腹腔注射。 称重、吸药、注射部位要准确。 给药顺序： 间隔跳组法。 先做2、4、6组。 若2组全死，不做1组；6组部分死，补做7组 【注意事项】 本实验是定量实验，注射药量必须准确。 注射部位要正确，不能将药物注入肠腔、脏器或膀胱内。 观测指标是死亡。以呼吸、心跳停止为指标。 4.观察 观察内容：中毒表现，记录动物死亡数。 时间：到不再死亡为止。 一般24 h 半衰期1天时，至少应观察7天。 尼可刹米给药后一般10～20min恢复常态，故观察30min内的死亡率。 计算LD50 比较LD50 将计算出的实验组LD50与对照组LD50 进行比较得出结果。然后对结果进行分析讨论，最终得出结论。 成员和分工 组长：曲琳卓、王秋燕 开题报告宣讲：曲琳卓 动物实验 配药：王秋燕、李跃 称重：董光辉、田兆建 标记：李迪、赵格格 分组：黄铭江、金成杰 操作：曲琳卓、梁莎 观察：艾名士、刘鹏 撰写论文：曲琳卓、王秋燕、梁莎、李跃、李迪等 论文答辩：曲琳卓、王秋燕、梁莎、李跃 可行性分析 本实验已有基本的物质支持 实验人员具有基本的操作技能 关于空间大小对半数致死量的影响研究具有一定的创新性故本实验可行。 * * 2010级临床1班3.6组 指导老师：李秀国 李香