小鼠鼓室注射小干扰RNA导入内耳可行性研究-中华耳科学杂志.PDFVIP

中华耳科学杂志2013年第11卷第4期 · ·602 ·基础研究· 小鼠鼓室注射小干扰RNA导入内耳可行性研究 郑宏伟韩琳余力生 北京大学人民医院（北京 100034） 【摘要】目的探讨将小干扰RNA经鼓室注射导入小鼠内耳的可行性。方法选取三月龄健康小鼠，经鼓室注射荧 光标记的小干扰RNA探针以及热休克蛋白70（HSP70）小干扰RNA，三日后经耳蜗冰冻切片及基底膜铺片，检测小 干扰RNA进入内耳情况及外毛细胞中HSP70蛋白表达。结果鼓室注射荧光标记的小干扰RNA探针三日即可被成功 导入耳蜗组织，鼓室注射HSP70siRNA可抑制毛细胞内HSP70表达，与对照组相比有显著差异（p0.01）。结论小 鼠鼓室注射小干扰RNA是一种有效的将小干扰RNA导入内耳尤其是毛细胞的方法，在毛细胞损伤机制研究中有一 定应用价值。 【关键词】小干扰RNA；小鼠；毛细胞 【中图分类号】R764.3 【文献标识码】A 【文章编号】1672-2922（2013）04-602-04 DeliveryofShortInterferingRNAThroughOticBoneIntoMouseCochlea ZHENGHongwei, HANLin, YULisheng Corresponding author:YULisheng E-mail:yulish68@163.com 【Abstract】Objective Toinvestigatetheadvantagesofthemethodofintra-tympanicinjectionthroughtheoticbonefor thedeliveryofsiRNAintotheadultmousecochlea. Methods Afluorescently-conjugatedscrambledsiRNAprobewasap⁃ pliedviaintra-tympanicinjectionintothemiddleearcavitytodetectifthesiRNAprobecouldbedeliveredintoorganofcorti andHSP70siRNAwasdeliveredintocochleatoreducetheexpressionofHSP70inhaircells. ResultsFluorescently-conjugat⁃ edscrambledsiRNAprobewasdetectedinsensoryhaircellsandnervefibers3daysaftertheinjection.Intra-tympanicdeliv⁃ eryofHSP70siRNAsuccessfullyreducedimmunofluorescenceassociatedwithHSP70inouterhaircells3daysafterinjection. ConclusionIntra-tympanicinjectionthroughtheoticboneintothemiddleearcavityprovidesapromisingapproachfordeliv⁃ eryofcompoundsorsiRNAtocochlearhaircellsofmice,relevantforthestudyofmechanismsunderlyinginnerearinsults. 【Keywords】siRNA；Mice；haircells RNA干扰（RNAinterference，RNAi）是近几年发 NA通常不能在内耳中达到有效的浓度并发挥作 展起来的一种新技术，可阻断特定基因表达，在基因 用。因此，寻找有效的将siRNA导入内耳的局部给 治疗及基础研究中有巨大潜力。小干扰RNA（small 药方式，可为内耳基础研究提供更多的方法与途径。 interfe