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草鱼酸性磷酸酯酶的性质及金属离子对其活性的影响-中国水产科学
第17卷第5期 中国水产科学 Vol.17 No.5
2 0 1 0 年 9 月 Journal of Fishery Sciences of China September 2010
草鱼酸性磷酸酯酶的性质及金属离子对其活性的影响
杨立红,肖波,王晓洁,侯月利,王佳,孙静
(鲁东大学 生命科学学院,山东 烟台 264025)
摘要:以草鱼肝脏为材料提取一种酸性磷酸酯酶(ACPase,EC.),进一步用(NH )SO 沉淀分离,Sephadex G-200
4 2 4
柱纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度鉴定呈现单一酶蛋白带,该酶紫外吸收峰为240 nm和280 nm,等电点为4.8,相对分
子质量为100 046.1。该酶水解对硝基苯磷酸二钠(pNPP)的最适pH值为4.4,最适温度为45 ℃,并有热激活现象,热激
活温度为60 ℃。耐热实验表明,该酶在最适温度下耐热时间为33 min,最适温度下20 min时表现出最大活性。在60 ℃
下耐热时间为25 min,15 min时表现最大活性。酶促反应初速度为0.047 5 μmol/min,最大反应速度为0.153 μmol/min。
-3 + + +
米氏常数 Km 值为3.56 ×10 mol/L。金属离子对酶活性影响的研究结果表明,K 对酶有激活作用,Li 、Na 对酶的活性
2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+
没有明显影响;碱土金属离子Mg 、Ca 和Ba 对酶有激活作用,其激活程度由大到小依次为:Ba 、Mg 、Ca ; Mn 对
2+ 2+ 2+ 2+ 2+ + 2+ 2+
酶有激活作用,Zn 、Cu 、Co 则有抑制作用;重金属离子Hg 、Pb 、Ag 和Cd 对酶有抑制作用,其中Hg 的抑制效
应最强。Mg2+和 Cu2+ 的作用机制研究结果表明,Mg2+对酶具有混合型激活作用,Cu2+对酶具有竞争性抑制作用。[中
国水产科学,2010,17(5):969-976]
关键词:草鱼;酸性磷酸酯酶; 金属离子;活性
中图分类号:Q556;S917 文献标识码:A 文章编号:1005-8737-(2010)05-0969-08
草鱼( )是中国重要淡水经 材料与方法
Ctenopharyngodon idellus 1
济鱼类。养殖水环境与鱼体的健康息息相关,水环
1.1 实验材料、试剂和仪器
境的污染会导致草鱼生长不良。其原因之一是某
草 鱼( )成 鱼,体 质 量
Ctenopharyngodon idellus
些金属离子尤其是重金属离子,对鱼体内的酶产生
1 500 ~2 000 g。对硝基苯磷酸二钠(pNPP)购于Sigma
抑制作用。其中,酸性磷酸酯酶(ACPase)在鱼体生
公司,葡聚糖凝胶(SephadexG-200)为P
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