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* * 专题2 :微生物的培养与应用 培养基的营养物质和无菌技术的应用 培养基的营养物质和无菌技术的应用 了解有关培养基和无菌技术的基础知识 1.何为培养基? 3.不同的培养基有不同的配方,但是其基本成分都相同,都包括哪些营养元素?有何作用?请举例说明。 阅读教材P14~15相关内容,回答以下问题: 2.按照不同的培养基划分标准,培养基有哪些种类、配制特点及其应用? (一)培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 加入青霉素等抗生素 分离固氮菌 不加氮源 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入青霉素 分离杂交瘤细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷 分离自养型微生物 不加含碳有机物的无碳培养基 分离金黄色葡萄球菌 加入高浓度食盐 应用 培养基 液体培养基 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 固体培养基:菌落,菌苔 半固体培养基 无动力 有动力(弥散) (是否运动?) 4.何为无菌技术?无菌技术包括哪些方面? 5.什么是消毒?灭菌?两者有何区别? 6.常用的消毒与灭菌的方法有哪些?有何要求? 7.请说出干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法的操作步骤。 (二)无菌技术 1.何为无菌技术?无菌技术包括哪些方面? 2.什么是消毒?灭菌?两者有何区别? 3.常用的消毒与灭菌的方法有哪些?有何要求? 4.请说出干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法的操作步骤。 (二)无菌技术 (二)无菌技术 1. 概念 无菌技术又称无菌操作,泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。 ① 煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min ② 巴氏消毒法:70~75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min ③ 化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;用氯气消毒水源等 ④ 紫外线消毒 (1)消毒的方法 2.常用的消毒与灭菌的方法 ①灼烧灭菌 ②干热灭菌:160~170 ℃下加热1~2h。 ③高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15~30min. (2)灭菌的方法 1.关于微生物营养物质的叙述中,正确的是 A、是碳源的物质不可能同时是氮源 B、凡碳源都提供能量 C、除水以外的无机物只提供无机盐 D、无机氮源也能提供能量 答案:D 2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 A、防止杂菌污染 B、消灭杂菌 C、培养基和发酵设备都必须灭菌 D、灭菌必须在接种前 答案:B * * *
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