激光扫描共聚焦显微镜检测Fluo-3AM负载大鼠心肌-中国农学通报.PDFVIP

中国农学通报 2013,29(17):80-84 Chinese Agricultural Science Bulletin 激光扫描共聚焦显微镜检测Fluo-3 AM 负载大鼠 心肌微血管内皮细胞最佳浓度和时间的探讨 1 1 1 1 2 1 冯 波 ，董 虹 ，张 涛 ，胡 格 ，房克凤 ，穆 祥 1 （北京农学院动物科学技术学院/兽医学（中医药）北京市重点实验室，北京102206； 2 北京农学院/农业应用新技术北京市重点实验室，北京102206） 摘 要：为了探讨Ca2 + 荧光探针Fluo-3 AM 对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM 分别稀释成1、2、3、4 、5 µM/L，每一浓 度的探针分别装载细胞5、10、15、20 min ，应用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内荧光信号的强度、位 置、装载探针后细胞的形态来观察装载效果。结果表明：1 ～3 µM/L 的Fluo-3AM 负载5~20 min 均不出 现荧光信号；4 µM/L 的Fluo-3AM 负载5~ 10 min 时即出现荧光信号；5 µM/L 的Fluo-3 AM 孵育细胞 15 min 后出现清晰且分布均匀的荧光信号。Fluo-3AM 对贴壁生长的RMMECs 负载效果主要受探针浓 度和负载时间的影响。 关键词：激光扫描共聚焦显微镜；Fluo-3 AM ；大鼠；心肌微血管内皮细胞；钙离子 中图分类号：Q291 文献标志码：A 论文编号：2013-0945 Detection of Optimal Concentration and Time of Fluo-3 AM Loading Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells by Laser Scanning Confocal Microscope 1 1 1 1 2 1 Feng Bo , Dong Hong , Zhang Tao , Hu ge , Fang Kefeng , Mu Xiang 1 ( BeijingKeyLaboratoryofTraditionalChineseVeterinaryMedicine,BeijingUniversityofAgriculture, Beijing 102206; 2BeijingKeyLaboratoryforAgriculturalApplicationandNewTechnique,BeijingUniversityofAgriculture, Beijing 102206) Abstract: In order to explore the optimal concentration and the time of Fluo-3 AM loading Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells (RMMECs). Fluo-3AM were diluted to 1, 2, 3, 4, 5 µM/L and each concentration of the probe was mounted cells for 5, 10, 15, 20 min. Laser Scanning Confocal Microscope