分子生物学chapterDNA复制.pptVIP

* 尺蠖－－移种爬行动物，爬行时身体呈弓形 * 多细胞有机体中端粒酶活性受到抑制导致细胞分裂过程中染色体逐渐缩短，当端粒缩短到一定程度时，细胞开始衰老并最终死亡 ２００３年２月１４日，英国一个名叫多莉的克隆羊，因患严重肺病而接受“安乐死”。 １９９７年，生物学界发生了一件轰动世界的大事：克隆羊多莉诞生。 供体细胞（供体羊,取其乳腺中乳腺细胞）六岁，羊的平均年龄11～12，13岁 供体羊（白脸）,取其乳腺中乳腺细胞 在取另一母绵羊（黑脸）中未受精的卵细胞去除细胞核作受体细胞，使两者融合成“融合细胞”，然后转移到另一母绵羊（黑脸）的子宫中，最终的“多莉”为“白脸” 端粒中还存在一种端粒酶，它具有调控端粒长短的能力，其活性也随年龄大小而不同，年轻时，活性大，较容易延长端粒，这是年轻人不易显老的原因。此外，男性端粒长度缩短略快于女性，这也是男性平均年龄低于女性的原因。 人类衰老的机理极其复杂，其学说不下几十种。近年从分子与基因水平上提出的基因调控学说、DNA损伤修复学说、线粒体损伤学说以及端区假说已成为国际研究热点 * Licensing factor: required for initiation and inactivated after use Can only enter into nucleus when the nuclear envelope dissolves at mitosis 5’－3’ exonuclease activity (polymerase I, III) DNApolⅠ的5’－3’外切活性有以下三个特点： ? 必须有5’－磷酸末端 ? 被除去的核苷酸必须是已经配对的 ? 被除去的可以是脱氧核糖核苷酸，也可以是核糖 核苷酸 （切刻平移） 其中 DNApol Ⅲ 全酶有十种共22个亚基 β二聚体 －－滑动钳 Interaction between DNA and DNA polymerase The initiation of DNA synthesis in E.coli 2、真核生物的DNA聚合酶 α、β、δ、ε、γ五种 位置 核内 核内 核内 核内 线粒体 合成 与引发 修复 合成 合成,修复 复制 功能 酶结合 前导链 后随链 3’－5’校 NO NO Yes Yes Yes 正活性 α β δ ε γ Activation of the pre-RC leads to the assembly of the eukaryotic replication fork The activation of pre-RCs is tightly regulated by cyclin-dependent kinases (Cdks) （3）复制终止 a、终止序列 E.coli 有两个终止区域，分别结合专一性的终 止蛋白 序列一：terE terD terA 序列二：terF terB terC 每个区域只对一个方向的复制叉起作用 b、专一性终止蛋白 E.coli 中由 tus gene 编码 （terminus utilization substance） 通过抑制DNA螺旋酶而发挥终止作用 每次复制时只使用一个终止位点 ter 5、复制忠实性的保证 1、DNApol的3’?5’外切酶活性 (exonuclease activity) 2、DNApol只能从引物的3’ 端延伸DNA （需要RNA引物） a、碱基配对协同