透明颤菌血红蛋白基因在解淀粉芽孢杆菌中的表达及其-激光生物学报.pdfVIP

第 １９卷第６期 激　光　生　物　学　报 Ｖｏｌ．１９Ｎｏ．６ 　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 ２０１０年１２月 ＡＣＴＡ　ＬＡＳＥＲ　ＢＩＯＬＯＧＹ　ＳＩＮＩＣＡ Ｄｅｃ．２０１０ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７７１４６．２０１０．０６．０１３ 透明颤菌血红蛋白基因在解淀粉芽孢杆菌中 的表达及其影响 １，２ １ １ １ １ １ １ １ １ 刘清术 ，夏立秋 ，罗玉双 ，李敬业 ，张允雷 ，丁学知 ，胡胜标 ，余子全 ，孙运军 （１．湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室，湖南长沙４１００８１； ２．湖南省微生物研究所，湖南长沙４１０００９） 摘　要： 将强启动子Ｐ与透明颤菌血红蛋白基因（ｖｇｂ）通过重叠延伸ＰＣＲ进行融合，克隆到芽孢杆菌整合表 ４３ 达载体ｐＤＧ１７３０中，重组表达载体ｐＤＧＰ４３ｖｇｂ转化促生防病解淀粉芽孢杆菌 ＦＺＢ４２，ＷｓｅｔｅｒｎＢｌｏｔ和ＣＯ差光 谱分析表明重组菌株ＦＺＢ４２ＶＨｂ表达了有活性的ＶＨｂ蛋白，ＶＨｂ的表达对重组菌株菌体的生长及抗菌脂肽的 产生都有促进作用。在相同培养条件下，重组菌最大菌体密度比原始菌株提高了１４．４９％，抗菌脂肽ｆｅｎｇｙｃｉｎ 的产量提高了１．７４倍，抗菌脂肽ｓｕｒｆａｃｔｉｎ的产量提高了３．１４倍。 关键词： 透明颤菌血红蛋白基因；解淀粉芽孢杆菌；抗菌脂肽 中图分类号： Ｑ７８６ 文献标识码： Ａ 文章编号： １００７７１４６（２０１０）０６０７９００８ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａＨｅｍｏｇｌｏｂｉｎＧｅｎｅｉｎ ＢａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓａｎｄＩｔｓＥｆｆｅｃｔ １，２ １ １ １ １ ＬＩＵＱｉｎｇｓｈｕ ，ＸＩＡＬｉｑｉｕ ，ＬＵＯＹｕｓｈｕａｎｇ，ＬＩＪｉｎｇｙｅ，ＺＨＡＮＧＹｕｎｌｅｉ， １ １ １ １ ＤＩＮＧＸｕｅｚｈｉ，ＨＵＳｈｅｎｇｂｉａｏ，ＹＵＺｉｑｕａｎ，ＳＵＮＹｕｎｊｕｎ （１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｉｃｒｏｂｉａｌＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｏｆＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅＣｏｌｌｅｇｅｏｆＨｕｎａｎＮｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００８１，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ；２．ＨｕｎａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００９，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： ＴｈｅＶｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（ＶＨｂ）ｇｅｎｅ（ｖｇｂ）ｗａｓｐｌａｃｅｄｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｈｅＰ４３ｐｒｏｍｏｔｅｒｂｙｏｖｅｒ ｌａｐｐｉｎｇｅｘｔｅｎｓｉｏｎＰＣＲ．ＴｈｅｖｇｂｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃａｓｓｅｔｔｅｗａｓｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｏｆＢａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ＦＺＢ４２ｕｓｉｎｇｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅｖｅｃｔｏ