微小rna-199a-5p调控大鼠心肌细胞肥大的研究.pdfVIP

·４０８· 中国病理生理杂志　ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　２０１４，３０（３）：４０８４１３ ［文章编号］　１０００４７１８（２０１４）０３０４０８０６ 微小ＲＮＡ１９９ａ５ｐ调控大鼠心肌细胞肥大的研究 １ ２ １ １ ２△ 张振辉 ，　黎　佼 ，　熊旭明 ，　陈伟燕 ，　刘世明 １ ２ （广州医科大学附属第二医院 重症医学科，心血管内科，广州心血管疾病研究所，广东 广州５１０２６０） 　　［摘　要］　目的：探讨微小ＲＮＡ１９９ａ５ｐ（ｍｉＲ１９９ａ５ｐ）在心肌肥大模型中的表达及对大鼠心肌细胞肥大的 调控作用。方法：用腹主动脉缩窄术（ＴＡＡＣ）构建心肌肥大大鼠模型，体外培养新生 ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠心肌细 胞，用血管紧张素ＩＩ（ＡｎｇＩＩ）诱导心肌细胞肥大，荧光定量ＰＣＲ（ｑＲＴＰＣＲ）检测动物血浆和心肌细胞ｍｉＲ１９９ａ５ｐ 含量；合成大鼠ｍｉＲ１９９ａ５ｐ的拟似物（ｍｉｍｉｃ）和抑制剂（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ），用脂质体转染ｍｉｍｉｃ和ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ进入心肌细胞， 用ｑＲＴＰＣＲ检测肥大基因心房钠尿因子和 肌球蛋白重链ｍＲＮＡ的表达变化；用氚标亮氨酸掺入量检测细胞蛋 β 白合成速率变化；用细胞荧光染色法检测细胞表面积变化。结果：ＴＡＡＣ术后２８ｄ，大鼠血浆ｍｉＲ１９９ａ５ｐ的含量 较对照组显著增加 （Ｐ＜０．０５），在ＡｎｇＩＩ诱导肥大的心肌细胞中，ｍｉＲ１９９ａ５ｐ的表达量也较对照组显著增加。在 心肌细胞中过表达ｍｉＲ１９９ａ５ｐ，能使细胞肥大基因表达增加，蛋白合成速率加快，细胞表面积增大，而使用ｉｎｈｉｂｉ ｔｏｒ阻遏ｍｉＲ１９９ａ５ｐ的作用后，能抑制ＡｎｇＩＩ诱导的肥大基因表达、细胞蛋白合成速率和细胞表面积的变化。结 论：心肌肥大动物和细胞模型中ｍｉＲ１９９ａ５ｐ的表达发生上调。过表达ｍｉＲ１９９ａ５ｐ能促进体外培养的心肌细胞 肥大，而阻遏ｍｉＲ１９９ａ５ｐ的作用能抑制ＡｎｇＩＩ诱导的心肌细胞肥大。 ［关键词］　微小ＲＮＡ；心肌肥大；血管紧张素ＩＩ 　　［中图分类号］　Ｒ５４１．３　　　　　［文献标志码］　Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００４７１８．２０１４．０３．００５ ＲｅｇｕｌａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ１９９ａ５ｐｏｎｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｉｎｒａｔ １ ２ １ １ ２ ＺＨＡＮＧＺｈｅｎｈｕｉ，ＬＩＪｉａｏ，ＸＩＯＮＧＸｕｍｉｎｇ，ＣＨＥＮＷｅｉｙａｎ，ＬＩＵＳｈｉｍｉｎｇ １ ２ （ＩｎｔｅｎｓｉｖｅＣａｒｅＵｎｉｔ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＧｕａｎｇｚｈｏｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＤｉｓｅａｓｅｓ，ＴｈｅＳｅｃｏｎｄ ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０２６０，Ｃｈｉｎａ．Ｅｍａｉｌ：ｇｚｌｉｕｓｈｉｍｉｎｇ＠１２６．ｃｏｍ） 　　［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］　ＡＩＭ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ１９９ａ５ｐｉｎｒａｔｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｍｏｄｅｌｓ． ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｔｈｅｉｎｖｉｖｏｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｔｒａｎｓｖｅｒｓｅａｂｄｏｍｉｎａｌａｏｒｔｉｃｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎ （ＴＡＡＣ）ａｎｄｔｈｅｉｎｖｉｔｒｏｍｏｄｅｌｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎＩＩ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏ