靶向siRNA干扰hIAP-2联合姜黄素抑制肾癌GRC-1细胞增殖的实验研究.pdfVIP

肿瘤药学2017年2月第7卷第 1期 Anti—tumorPharmacy，February2017，Vo1．7，No．1 —33一 靶向siRNA干扰hlAP一2联合姜黄素抑制肾癌GRC一1 细胞增殖的实验研究 印重任 ，李远伟 ，吴万瑞 ，卢 强 ，李 卓 ，刘 旭 (南华大学，湖南衡阳，421001；湖南省人民医院泌尿外科，湖南长沙，410001) 摘要：目的 应用hIAP一2特异性siRNA干扰肾癌GRC一1细胞hlAP一2基 因的表达，探讨siRNA～hIAP～2联合姜黄素 对肾癌GRC一1细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外化学合成针对hlAP一2的siRNA，通过阳离子脂质体将 siRNA—hIAP一2 转染肾癌GRC一1细胞 ，实时荧光定量PCR检测hlAP一2mRNA表达水平，免疫印迹检测其蛋白表达水平，MTT法及流式细 胞术分别测定siRNA—hlAP一2联合姜黄素处理后对肾癌GRC一1细胞增殖及凋亡的影响。结果 靶向hIAP一2的siRNA可 以有效抑制肾癌 GRC一1细胞的hlAP一2的表达，siRNA—hlAP一2和姜黄素均可抑制GRC一1细胞增殖并诱导其一定程度的 凋亡，当联合应用靶向hlAP一2的siRNA和姜黄素时，上述作用显著增强 (P0．05)。结论 体外化学合成的siRNA—hlAP一2 可以有效抑制肾癌GRC一1细胞的hlAP一2的表达，并能显著增强姜黄素诱导肾癌细胞GRC一1凋亡的敏感度，提示hlAP-2 可作为姜黄素治疗肾癌的有效增敏靶点。 关键词：hlAP-2；肾癌；RNA干扰；姜黄素；GRC一1细胞 中图分类号：R737．11 文献标识码：A 文章编号：2095—1264(2017)01—0033—05 doi：10．3969~．issn．2095—1264．2017．01．07 DownregulationhIAP一2withsiRNA EnhancetheChemosensitivityofRenal CancerGRC-1CellLinetoCurcumin YINZhongren1 , LIYuanwei~WUWanrui。LUQianf,LIZhuo2,LIUXu rUniversityofSouthChina，，Hengyang,Hunan,421001，China；2DepartmentofUrologicalSurgery,HunanPr~incialPeo- pie’SHospital,Changsha，Hunan,410001，China) Abstract：ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeffectoftargetingsiRNA-hlAP-2combinedcurcuminagainstGRC-1cellline． M ethodsRenalcancercellGRC一1wasculturedandtransfectedwithsiRNA-hlAP-2．ThenrealtimePCR andWesternblottingwere performedtodetectthechangesofmRNA andproteinofMAP一2．Finally，MTTassayandflow cytometrywereusedtoanalysetheprolif- erationandapoptosisoftargetinghIAP一2combinedcurcunlinagainstGRC一1cellline．ResultSiRNA-hIAP-2coulddown-regulatethe expressionofMAP一2mRNAandprotein．BothcureuminandsiRNA-hIAP-2couldinduceapoptosisandinhibitproliferationinGRC-1 cellline．Moreover，asynergiceffectagainstproliferationandsurvivalofcombinedsiRNA—hlAP一2withcurcumininGRC一1celllinewas noted．C