核转染仪辅助转染肝素酶基因sirna有效性的试验-现代仪器与医疗.pdfVIP

《现代仪器与医疗》 2013 年 第 19 卷 第 5 期 论    著 核转染仪辅助转染肝素酶基因siRNA有效性的 实验研究* Efficacy study of transfection of siRNA of Heparanase gene by nuclear transfetion machine 摘  要  目的 研究核转染仪转染肝素酶基因siRNA 的有效性。方法 采用核转染 1,2 3    张彩虹   董宏伟   仪辅助转染技术和常规脂质体转染技术转染针对肝素酶基因启动子区和编码区设计 1 1 肖文华 **  董伟伟   1 1 siRNA ，并通过实时定量RT-PCR ，Western blot 等技术检测2 种转染技术转染后，肝 赵慧霞   段昕妤     1 1 癌细胞SMCC-7721 在48h 、72h 和96h 时肝素酶基因表达情况。结果 2 种转染技 李秋文   郝怡鑫   1 1 术在转染后48h ，从mRNA 和蛋白水平上均能成功干扰掉肝素酶基因；但在转染后 王如良     朱建华   叶 明1 72h ，脂质体转染组基因很快恢复表达，而核转染仪转染组基因仍保持沉默；在96h 后， Zhang Caihong Dong Hongwei 2 组的肝素酶基因均恢复表达。结论 核转染仪可有效转染肝素酶基因siRNA ，并使 Xiao Wenhua Dong Weiwei 肝癌细胞SMCC-7721 的肝素酶基因表达下调，且维持较长时间。 Zhao Huixia Duan xinyu 关键词  核转染仪 肝素酶基因 肝癌细胞 Li Qiuwen Hao Yixing Wang Ruliang Zhu Jianhua Abstract Objective To study the effects of transfection of siRNA of heparanase(HPA) Ye Ming gene by nuclear transfection machine and lipofection in liver cancer cell SMMC- 7721. Methods Several of the siRNA covered promoter region and coding region of (1.解放军总医院第一附属医院 HPA gene respectly were designed and synthesed ,and then transfected into the hepatoma 肿瘤一科  北京  100048  2. 青海大学医学院免疫教研室  cells SMMC-7721 by neuclear trancfection. HPA gene expression in both mRNA and 西宁  810001  3.66055部队医 protein were detected by RT-PCR, Western blot techniques. Results Both nuclear 院  北京  101300) transfection and lipofection of siRNA of HPA gene can almost