CYP2E1 RasⅠ基因型在苯酚诱导的酶活性变化和DNA损伤过程中的作用.pdfVIP

2006年第四届环境与职业医学国际学术研讨会论文集 ofthe矿InternationalAcademicConferenceonEnvironmentaland Medicine ·382· Proceedings Occupational Ras CYP2E1 I基因型在苯酚诱导的酶活性变化和 DNA损伤过程中的作用 范凯红，张娟，尹立红，浦跃朴 Rsa 摘要：[目的]比较苯代谢中间产物苯酚对CYP2E1I不同基因型永生化人淋巴细胞的CYIY2E1酶诱导活性及 DNA损伤作用，探讨CYP2EI基因RsaI位点结构、功能与效应之间的关系，以及苯的毒性机制。[方法]加入不同浓度 的苯酚对CYP2E1RsaI不同基因型的永生化人淋巴细胞进行24～72h染毒，采用MTT法测定细胞毒性并确定苯酚染毒剂 酚24h染毒对CYP2E1RsaI野生、杂合及突变基因型细胞均产生生长抑制作用，苯酚对细胞24～72h染毒的最大无作用 Rsa 浓度为0．01％。0．01％苯酚48h染毒后均可诱导CYP2E1I野生、杂合及突变基因型细胞的CYP2E1酶活力，其酶活 Rsa 对CYP2E1I野生、杂合及突变基因型细胞染毒24h、48h及72h后均出现DNA损伤效应，野生基因型细胞的DNA 损伤效应更为明显(P0．05 Rsa RsaI野生基因 I不同基因型明显影响苯酚对人淋巴细胞CYP2E1酶的诱导活性和DNA的损伤程度，其中CYP2E1 型细胞的作用最为明显。CYP2E1RasI位点基因结构可能通过改变CYP2E1酶活性，继而影响苯酚对细胞的DNA毒性， CYP2E1Rsa I野生基因型可能是苯毒性的易感基因。 关键词：苯酚；基因型；永生化人淋巴细胞；CYP2E1酶活性；DNA损伤 结构、功能与效应之间的关系，以及苯的毒性机制和易感基因 CYP2E1是CYP450酶系的重要成员之一，主要参与苯、乙 醇等多种低分子量化合物的代谢[1’2]。近年来随着经济的增长 提供科学依据。 和生活质量的改善，苯的低剂量的生活暴露如装修后导致的室 内空气苯暴露已经极为普遍，因此人们高度怀疑苯可能通过 1材料和方法 广泛的非职业暴露对我国人群近年来白血病的高发负有一定 1．1实验对象 的责任[3】。苯是肯定致癌物，一般认为苯进入机体后，首先在 汉族人外周血永生化淋巴细胞系由本实验室构建，其中 CYP2E1基因RasI位点野生型9株、杂合型3株及突变型3株。 肝脏被CYP2E1氧化为苯环氧化物，苯环氧化物可经过非酶性 重排自发形成苯酚，苯酚可在CYP2EI的催化下进一步代谢为1．2实验材料 苯的双羟基或i羟基化合物(氢醌、儿茶酚、苯三醇等)，最终 苯酚(分析一纯试剂)；溴化一3一(4，5一二甲基噻唑 形成高活性致癌物。CYP2E1与苯的活化密切相关，而CYP2E1 酶的诱导活性在不同人群或个体间的变化很大…，研究认为这 I、Pst 血清(杭州四季青生物制品公司)，LMPA(FMCUSA)；NMPA 种差异主要是由于5’一端上游调控区、Rsa I及第六内 含子区DraI的多态[5“】影响了该基因的功能，进而影响了对 (spanish分装)；Triton 苯的代谢活化。明确CYP2EI的结构、功能与效应的关系，对 进一步阐明苯的致癌机制，确定CYP2E1作为苯毒性的易感基 因，具有重要的学术价值。 ． 上海凌锋化学试剂有限