细菌的观察.pptVIP

电子显微镜的分辨率为1nm。不仅能看清细菌的外形，内部超微结构可一览无余。 革兰染色法： 结晶紫 碘液 95%乙醇 复红 抗酸染色： 石炭酸复红 3%盐酸酒精 美兰 其它特殊染色 * 细菌的形态结构观察 微生物及免疫学科组 2009/03/16 一、实验与实验报告要求 二、显微镜的使用 三、细菌一般形态和结构的观察 四、细菌特殊形态和结构的观察 实验内容 一、掌握细菌的一般形态和结构 二、掌握普通光学显微镜的结构、基本原 理、维护和保养方法、正确使用方法 三、掌握细菌一般形态和排列方式 四、了解细菌特殊形态和结构 实验要求 电子显微镜(electron microscope) 肺炎链球菌荚膜 荚膜 显微镜放大法 普通光学显微镜分辨率为0.25um 普通光学显微镜 样本控制：载物台——样本夹——显微操纵器 照明——灯发出光线——可变电阻器改变光线的强度 ——聚光器调整光线到样本的透镜系统 ——光圈改变到达聚光器的光量，用于增强图像的对比度 透镜部——物镜采集样本上的光 ——目镜将物镜的图像传送并放大——换镜旋座固定有多个物镜的旋座 ——镜筒将目镜固定在与物镜具有适当距离的位置，并挡住杂散光 对焦部——粗调焦旋钮用于将物体的图像调至物镜的焦面上 ——精调焦旋钮用于精细调节图像的对焦 支撑和校准部 ——架臂固定距离进行撑托并校准的弧形部分 ——底座支撑显微镜所有零部件的重量 油镜工作原理 普通光学显微镜 1.调节光源 使用时，首先调节光源，采用电光源，可以通过开关调整光亮度，使视野内得到均匀柔和明亮的照明。 2. 选接物镜  辨别不同的接物镜，观察细菌用的油镜是100倍或Oil，透镜孔最小。 3. 滴油  有标本的载玻片上滴一滴香柏油，不可有气泡，并缓缓将油镜浸于香柏油中。 普通光学显微镜 4.接物镜浸入油中 从侧面观察，用粗调节器缓缓将油镜浸于香柏油中，但不要使镜头压及标本，以免损坏镜头。 5调节焦距 缓缓用粗调节器使油浸镜慢慢离开标本，当视野中出现模糊影像时，再用细调节器调焦距，使影像清晰。 6. 观察  观察着色深的标本宜采用较强的光，着色浅或未染色的标本可用略暗的光。物像的清晰程度取决于接物镜的分辨力。 油镜的保养 用擦镜纸擦去香柏油； 再用滴有一滴二甲苯的新的擦镜纸溶去残留的香柏油； 3. 用第三张擦镜纸将可能残留的二甲苯擦净，以防止二甲苯浸入物镜，损坏镜头。 细菌形态和排列的观察 细菌形态与染色特性的观察 革兰氏阳性 革兰氏阴性 抗酸染色 细菌形态与染色特性的观察 鞭毛的观察 单毛菌 芽孢的观察 荚膜的观察 肺炎链球菌荚膜 荚膜 染色法 1min 1min 1min 脱色 5min 脱色 革兰阳性 革兰阴性 抗酸染色 普通光学显微镜的分辨率为0.25um。一般细菌都大于0.25um，故可用普通光学显微镜观察 观察细菌前，应在有标本的载玻片上滴一滴香柏油，并缓缓将油镜浸于香柏油中，但不要使镜头压及标本，以免损坏镜头。然后，从接目镜注视视野，同时，缓缓用粗调节器使油浸镜慢慢离开标本，当视野中出现模糊影像时，再用细调节器调焦距，使影像清晰。观察着色深的标本宜采用较强的光，着色浅或未染色的标本可用略暗的光。物像的清晰程度取决于接物镜的分辨力，因此，若物像不清晰并不能改用放大倍数高的接目镜的办法解决。通常情况下，可用10～15倍的接目镜进行观察。使用完毕后，用新的擦镜纸擦去香柏油，再用滴有一滴二甲苯的擦镜纸擦1～2下，然后用第三张擦镜纸将可能残留的二甲苯擦净，以防止二甲苯浸入物镜，损坏镜头。擦镜头时只按一个方向擦，不可来回擦。 值得注意的是，若按上述操作看不到目的物时，可能有二种情况：一是接物镜镜头下降还不到位；二是抬起镜头时速度过快，用力不均，以至眼睛捕捉不住一闪而过的物像。此时，需按上述步骤重新操作。即使多次操作没有成功，也决不能在接物镜已经接触到香柏油的情况下，采取眼睛对着接目镜，边观察，边用精调节器下行寻找目的物的操作方法。 观察细菌前，应在有标本的载玻片上滴一滴香柏油，并缓缓将油镜浸于香柏油中，但不要使镜头压及标本，以免损坏镜头。然后，从接目镜注视视野，同时，缓缓用粗调节器使油浸镜慢慢离开标本，当视野中出现模糊影像时，再用细调节器调焦距，使影像清晰。观察着色深的标本宜采用较强的光，着色浅或未染色的标本可用略暗的光。物像的清晰程度取决于接物镜的分辨力，因此，若物像不清晰并不能改用放大倍数高的接目镜的办法解决。通常情况下，可用10～15倍