1种基于平板共培养筛选抗菌海洋放线菌的方法刘姝.pdfVIP

网络出版时间：2017-09-28 09:55:21 — ２５４— 江苏农业科学　２０１７年第４５卷第１７期 网络出版地址：/kcms/detail/32.1214.S0955.026.html 刘　姝，房耀维，王淑军，等．１种基于平板共培养筛选抗菌海洋放线菌的方法［Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（１７）：２５４－２５９． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１７．１７．０６７ １种基于平板共培养筛选抗菌海洋放线菌的方法 １，２ １，２ １ ２ ２ ２ ２ 刘　姝 ，房耀维 ，王淑军 ，焦豫良 ，陈国强 ，潘建梅 ，金志勇 （１．江苏省海洋资源开发研究院，江苏连云港２２２０００；２．淮海工学院海洋学院，江苏连云港２２２００５） 　　摘要：为开发１种基于共培养的抗菌性海洋放线菌平板高效筛选方法，并对菌株提高放线菌产抗菌物质能力的机 制进行探索，以单独培养的海葵共附生放线菌为对照，研究与菌株共培养对海葵共附生海洋放线菌抗菌性菌株筛选效 率的影响，以及不同生长期蜡样芽孢杆菌菌株ＢａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓＡＳ１．１８４６的发酵液、发酵液添加量和添加时间对放线菌 菌株ＡＡＡ０１５抗菌活性的影响，初步探索提高放线菌抗菌活性的机制。结果表明，通过平板共培养可以显著提高抗菌 性海洋放线菌筛选效率。Ｂ．ｃｅｒｅｕｓＡＳ１．１８４６从稳定期开始分泌到胞外提高放线菌抗菌活性、对热稳定的次生代谢产 物，少量的该物质即可显著提高菌株ＡＡＡ０１５的抗菌活性。获得了１种基于共培养的高效抗菌活性海洋放线菌平板 筛选方法。 　　关键词：平板；共培养；海洋放线菌；抗菌活性；筛选 　　中图分类号：Ｓ１８２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１７）１７－０２５４－０５ 　　抗生素在人类与植物病原微生物的斗争中起到了举足轻 有抗菌活性海洋放线菌的高效方法，对提高菌株抗菌活性的 ［１］ 重的作用 。但是，由于抗生素的广泛使用乃至滥用，导致 物质来源进行探索。 多重耐药菌（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐａｔｈｏｇｅｎｓ，简称 ＭＤＲ）出现 １　材料与方法 并有蔓延态势，筛选新颖的抗菌活性物质用于生物农药的开 ［２－３］ 发成为对抗多重耐药菌的主要方法之一 。不幸的是，尽 １．１　材料 管抗菌活性物质筛选技术、合成生物学以及化学修饰技术快 １．１．１　样品　采集连云港连岛海域（３４°７６′Ｎ，１１９°４８′Ｅ）活 速发展，但新型抗菌活性物质的发现速率却依然难以满足药 黄海葵，样品置于无菌玻璃瓶内，立即放于冰盒保存，并尽快 ［４］ 剂市场的需求，导致公众健康仍然面临巨大威胁 。幅员辽 送回实验室进行处理。 阔、环境复杂多样的海洋蕴含种类、数量极其巨大的新颖抗菌 １．１．２　试验菌株　蜡样芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓＡＳ１． ［５］ 活性物质 。研究表明，目前筛选获得的抗菌物质只是宝藏 １８４６）、金黄色葡萄球菌（ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓＡＳ１．２４６５）、大 的冰山一角，更多的新颖抗菌活性物质有待研究者去开 肠杆菌（ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＡＳ１．４８７）、啤酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ［６］ 发 。因此，需要进一步开发快速的抗菌活性物质筛选 ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＳ２．１１４）、巴斯德毕赤酵母（ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＧＳ１１５）、 技术。 扩展青霉（Ｐｅｎ