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植物根系分泌物的分离方法
植物根系分泌物的分离方法 主要内容 根系分泌物简介 根系分泌物作用 根系分泌物分离提纯方法 根系分泌物简介 在植物生长过程中,根系不仅从环境中摄取养分和水分,同时也向生长介质中分泌质子,释放无机离子,溢泌或分泌大量的有机物。这些物质和根组织脱落物一起统称为根产物(root products) J,即根分泌物。 根系分泌物作用 养分胁迫和金属毒性的改善:在养分胁迫条件下,根系会主动或被动地分泌有机酸、酸性磷酸酯酶等物质,促进土壤根际固化的营养元素活化以利于植物利用。 化感作用:互相抑制和互相促进 自毒作用与连作障碍:根系分泌物中的自毒成分的积累可能是引起连作障碍的重要因素。 根系分泌物作用 影响根际微生物的种类和分布: 根系分泌物在根际与周围微生物的相互作用中具有重要作用,植物连作后的土壤微生物种群明显变化,细菌数量减少,真菌数量增加。 阶段性分离方法 溶液培法: 根据溶液中不同元素组分,又可将溶液培养收集分为简单溶液收集和特定营养液收集。 根系分泌物的分离方法 根据分离过程是否是连续的可将分离方法分为间歇性(阶段性)分离方法和持续性分离方法: 阶段性分离方法: 溶液培收集法 基质培收集法 土培收集法 连续性根系分泌物收集方法 阶段性分离方法 简单溶液收集方法 简单溶液收集方法根系分泌物是指将植株苗经过胁迫处理后,用无菌蒸馏水清洗,再放入预先加入微生物抑制剂的溶液中,使之生长一段时间,然后将植株移走,收集其培养液,过滤,即为所收集的根系分泌物。 阶段性分离方法 特定营养液收集: 特定营养液收集是指将植株苗放置在缺乏或过量特定元素的完全营养液生长一段时间后,收集其营养液,即为所收集的根系分泌物。 阶段性分离方法 基质培收集法: 基质培收集和土培收集基本类似,只是植物的生长介质不同。基质培养收集根系分泌物常用的基质有石英砂、琼脂、蛭石和人造营养土等。 阶段性分离方法 石英砂培收集方法 石英砂培收集方法是在实验处理下将植株在石英砂中进行培养一段时间后,然后用蒸馏水或是有机溶剂短时间浸泡石英砂,收集其浸泡液,再浓缩过滤即为根系分泌物。 土培收集法: 传统的方法是将植物种植于土壤中,生长一段时间后直接获取根际土壤,将其与无菌水按一定比例混合、振荡、离心或过滤,所得滤液即为根系分泌物。或将生长在特定土壤基质一段时间后的植株根系直接用蒸馏水淋洗,所得根系淋洗物即为根系分泌物,这种方法也称为根系淋洗法。 阶段性收集方法 琼脂收集法: 琼脂培养收集方法是将植株幼苗置于琼脂介质中,生长一段时间后,收集根系周围以及附着在根系上的琼脂,加热溶解,过滤,收集其过滤液即为根系分泌物。 琼脂收集法操作简单,但是在培养过程中要注意防止微生物污染。 连续性收集方法 目前一些研究者自行设计了连续性根系分泌物收集系统,如(图1): 连续性根系分泌物收集系统的工作原理一般就是将植物移栽到底部连接到根系分泌物收集器的培养容器中,培养过程中,植物的培养液在向下渗流的过程中将根系分泌物先下淋洗,使根系分泌物在收集器中被不断富集,而培养液则又循环到 培养容器中。一般使用选择性吸附树脂柱收集根系分泌物,在收集完成后,再用合适的洗脱剂将根系分泌物洗脱下来。 连续性收集方法优势 连续性根系分泌物收集系统能够在现实栽培中,对根系不造成伤害的情况下,实时、连续、准确地收集根系分泌物。但是在利用连续性根系分泌物收集系统收集根系分泌物时,需要注意防止培养容器、连续装置各部件被细菌污染,另外,在收集根系分泌物时要控制培养液循环的流速,保证根系分泌物能够被充分收集。 其他提取分离方法 也有一些学者改变土培收集根系分泌物的传统方法,将离子膜、纤维素薄膜或是层析滤纸置于根系表面,一段时间后进行回收,用浸提液(如甲醇、酒精)对离子膜、纤维素薄膜或是层析滤纸多次浸提,得到根系分泌物。 谢 谢!! 青衣 * 青衣 * 方法法国 青衣 * 方法法国 * *
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