基因疗法-从第一代走向第二代.docVIP

基因疗法:从第一代走向第二代基因疗法是通过对病人异常的致病基因进行剪接，然后用正常的基因修补致病基因，达到治愈疾病的目的。如果仅从基因疗法的方法上来区分，可以把今天的试验性基因疗法分为第一代和第二代。第一代基因疗法是利用无害的病毒（一般是腺相关病毒）作为载体，把正常基因运载到异常基因部位，以取代或纠正异常基因。第二代基因疗法则是以特定的酶作为基因剪刀来剪掉异常基因，代之以正常的基因。 第一代基因疗法：安全是软肋 第一代基因疗法也可称为传统基因疗法。传统的基因疗法是利用对人体无毒无害的病毒作为载体，携带基因到基因缺失或基因异常部位，以修复基因。但是，这种携带基因进行治疗的方法是随机的，不像基因剪刀一样特异性强，定向比较明确。因此传统基因疗法具有不可预测性，很可能导致一些意想不到的副作用。病人在治疗疾病的同时，由于基因导入的位置不正确，会患上另一种疾病。 最早的基因疗法是美国医生采用的。1990年9月，美国的弗伦奇#8226;安德森医疗小组对一名患重症联合免疫缺陷综合征的4岁女孩进行基因注射疗法，取得成功，因而安德森被誉为“基因疗法之父”。安德森所使用的方法就是用腺相关病毒（AAV）来运载正常基因，以替换小女孩的异常基因。但是这种传统的基因疗法存在严重缺点，被病毒携带的治病基因有时不能到达病人体内的目标基因之处，而是跑到其他正常基因的部位，并产生基因调控或复制作用，导致新的疾病。 2002年8月，法国一个医疗小组对一名男孩进行试验性基因疗法，以治疗男孩的重症联合免疫缺陷综合征。从出生起这名男孩体内就缺乏抗感染所必需的白细胞，患儿2个月时，法国医生对他进行基因疗法。研究人员使用经过基因修饰的病毒，将患儿所缺乏的产生白细胞的基因导入其体内，但后来患儿却患了白血病。 对这个医疗事故进行调查后发现，男孩患白血病的原因是基因导入错误。携带治疗性基因的病毒在病人细胞的至少一个不适当位点导入了治疗性基因，新导入的基因破坏了细胞内原有的调控基因，使细胞开始不受控制地分裂，从而使患儿罹患白血病。 由于传统基因疗法的安全性得不到保证，尽管这类基因疗法可以治疗多种疾病，但迄今也只是一种试验性疗法，还不能进入临床作为常规疗法使用。 第二种基因疗法：试治艾滋病 既然用病毒携带基因不保险，为何不采用更为直接的基因疗法呢？这就是用基因剪刀把异常基因剪除，代之以正常基因。 剪接基因需要剪刀，这种剪刀并非人们在生活中使用的剪刀，而是一种酶分子，其名称叫作重组锌指蛋白核酸酶(ZFN)。基因剪刀由锌指蛋白与一种称为FokI的限制性内切酶组成。它可识别特定的基因位点，当两个识别位点相距恰当的距离时（6～8个碱基对），两个单体基因剪刀（ZFN）相互作用产生酶切功能，也就能定点剪切DNA特定片段，例如剪除异常的基因片段，并用正常基因替换异常基因，这就是第二代基因疗法的理论基础。 第二代基因疗法不仅可以治疗罕见的遗传病，而且可以治疗严重危害人们的疾病，如癌症和艾滋病。研究人员早就发现，艾滋病病毒（HIV）入侵人体的免疫T细胞首先是通过识别T细胞上的一些受体分子，通常有两类，一是CCR5，另一是CXCR4。迄今研究人员已鉴定出28种趋化因子受体，其中的趋化因子受体CCR5和CXCR4都与HIV-1的入侵有关，因为几乎所有的HIV-1病毒株都是利用自身的gp120蛋白与CCR5或CXCR4受体结合，或同时与这两种受体结合侵入T细胞。 能利用趋化因子受体CCR5侵入T细胞的HIV或其他病毒称为R5嗜性，能利用趋化因子受体CXCR4侵入T细胞的HIV或其他病毒称为X4嗜性，既能利用CCR5，又能利用CXCR4侵入细胞的病毒株则称为R5/X4嗜性。 由此，也为研究人员提供了一个思路，如果采用基因修剪和删除的方式，改变CCR5或CXCR4受体分子，就有可能让HIV难以识别T细胞，从而阻止HIV入侵T细胞。这一启发首先来自德国一个骨髓移植案例。德国一个医疗小组挑选了一位CCR5发生变异的骨髓捐献者，用他的骨髓治疗好了一名白血病兼HIV感染者。在治疗好了这名白血病患者两年后，病人多次检测也没有查出体内有HIV。这说明CCR5的变异让HIV难以感染新的T细胞。 于是，位于美国加利福尼亚州里奇蒙的一家生物科学公司――桑加莫（Sangamo）研发了一种基因剪刀，称为SB-728-902，也就是一种特殊的重组锌指蛋白核酸酶，其作用在于，这种基因剪刀可以特异性地和永久地改变T细胞DNA中为其自身细胞膜上的CCR5受体分子编码的基因。而在过去的研究中，研究人员发现，人的自然变异的CCR5分子――CCR5Δ32分子能抵御HIV的入侵，原因也在于由于基因突变导致了CCR5分子结构改变。通过锌指核酸酶（ZFN）基因剪刀对编码CC