IGF-1基因转染对大鼠成肌细胞增殖和分化的影响.pdfVIP

第 27卷 第 6期 长治医学院学报 VoI．27 No．6 2O13年 12月 JOURNAL OF CHANGZHI MEDICAL COLLEGE Dec． 2013 401 · 基础研究 · IGF一1基因转染对大鼠成肌细胞增殖和分化的影响 王晓林 王庸晋 荣书玲 马红彪 摘 要 目的：探讨人类胰岛素样生长因子一1(hlGF_1)基因转染对骨骼肌成肌细胞增殖和分化的作用及机 制。方法：分剐用pLghlGF-1SN质粒和对照质粒 pLgGFPSN转染成肌细胞作为 IGF组和 GFP组，未转染成肌 细胞作为细胞对照(Contro1)组。转染后用免疫细胞化学、RT_PCR检测 hlGF-1基 因在成肌细胞 中的表达。 MTT方法检测成肌细胞增殖能力，流式细胞仪检测成肌细胞的细胞周期变化。通过检测细胞融合率与磷酸肌 酸激酶(CK)含量检测 IGF-1基因转染对成肌细胞分化的影响。结果：基因转染后免疫细胞化学和RT-PCR检 测发现 IGF组细胞有hlGF-1表达，GFP组和Control组细胞未见hIGF-1表达；M兀、检测显示IGF组成肌细胞 光吸收值增大，与Control组和GFP组细胞相比，差异有显著性 (P0．05)；流式细胞仪检测显示：与对照组和 GFP组相比，IGF组G1期细胞百分比显著下降(P0．05)，S期细胞百分比则显著增加 (PO．05)。与对照组 和GFP组相比，IGF组成肌细胞融合率和CK合成显著增加 (PO．05)。结论：IGF-1基因转染对成肌细胞的 增殖与分化均具有促进作用，其作用是通过减少G1期成肌细胞数量，增加 S期细胞数量实现的。 关键词 类胰岛素样生长因子一1；成肌细胞；增殖；分化 中图分类号 R392．12 文献标志码 A 文献编号 1006一(2013)06—401—05 EffectsofIGF-1Gene~ansfectiono11theProliferationandDifferentiationofMyoblastsinRat WangXiaolin，WangYongjin，RongShuling， al DepartmentofPediatrics，AffiliatedHepingHospitalofChangzhiMedicalCollege Abstract Objective：T0investigatetheeffectsofhumaninsulinlikegrowthfactor-1(hlGF-1)ontheproliferationanddifferentiation ofmyoblastsinrats．Methods：Myoblastswereisolatedfrom severalSD rats，cultured，purified，andtransfeetde withplasmidpLghlGF- 1SN andpLgGFPSN．Themyoblastsweredividde intoIGFgroup (myoblaststransfectedwithpLghlGF-1SN，GFP group (myoblasts transfectedwithpLgGFPSN)．andControlgmup(untransfectedmyoblasts)．TheexpressionofhIGF-1inmyoblastswasinvestigatde by immunocytochemistryand reversetranscription polymerase chain reaction ( r_PCR)．M 1vr method wasused to determine the proliferationofmyoblasts．andflowcytometeranalysiswasusedtoobservecellcyclechangesofmyoblasts．、vedetectedthecellfusion rateandthecontentofcreatinekinase(CK)tOinvestigatetheeffectsofIGF—Igenetransfectiononthediffer