AgraQuant克伦特罗检测试剂盒说明书.PDFVIP

® AgraQuant 克伦特罗试剂盒说明书_ Mar28.11 AgraQuant® 克伦特罗 检测试剂盒说明书 编 号 ： COKDA0400 Intended Use 应用 AgraQuant ® 克伦特罗试剂盒应用直接竞争酶联免疫分析（ ELISA ）原理，定量检测尿液、肉 (肌肉 ) 和动物饲料中克伦特罗含量。 Clenbuterol 克伦特罗 克伦特罗和其它 β- 激动剂类药品已被证明可对产肉动物体内药剂进行再分配，从而实现降低动物肥肉 产量和增加瘦肉产量的作用。作为 β- 激动剂类的克伦特罗和沙丁胺醇常被非法添加到饲料中。这些药剂的 滥用严重影响人类的健康，例如会导致肌肉的痉挛或颤抖。最常见的症状还包括躁动、血压升高、眩晕和 恶心等。Romer Labs® 提供的 AgraQuant ® 克伦特罗试剂盒可以用来检测家畜尿液和组织中的克伦特罗含量。 Assay Principles 检测原理 AgraQuant ® 克伦特罗检测试剂盒应用直接竞争酶联免疫吸附原理。反应时，样品中药物或药物代谢物 与药物 - 酶的酶联偶合物竞争结合到有限的抗体特异性结合位点上。 1 个小时地孵育时间之后，通过洗板将 未结合的试剂洗掉 ( 酶联偶合物使用辣根过氧化物酶（ HRP ）作为标记物 ) 。由于克伦特罗-HRP 酶联偶合物 可以使无色 TMB 底物变为蓝色 ,所以克伦特罗 -HRP 酶联偶合物可以通过显色底物 TMB 检测到 ,TMB 底物反 应随着终止液的加入而终止，同时反应液颜色也变为黄色。随后在 450nm(OD450) 滤镜及 630 nm 示差滤镜 下使用酶标仪对微孔板进行吸光度值测量。样品或标准品浓度与吸光度值呈反比。 Precautions 注意事项 1. 试剂盒在不使用时，需放置在 2-8 ℃(35-46 ℉)保存，并确保在有效期之前使用。 2. 严格遵守操作说明书中标示的操作时间，否则将导致不精确的实验结果。 3. 由于存在交叉污染的风险 ,在准备样品前一定要将所用设备清洗干净。 4. 反应终止液中含酸，避免直接接触皮肤及眼睛。若不小心溅到，应及时用水冲洗。 5. 在使用试剂盒时需要佩戴保护手套和安全眼镜。 6. 检测完毕后需对所有材料、容器及设备作适当处理。 7. 每个微孔都会被作为比色皿使用。因此一定要避免触摸微孔的底部、侧面和内部。 8. TMB 底物溶液在低于 2 ℃时会结晶 ,此时会降低反应灵敏度。 9. 如果 TMB 底物颜色变为蓝色，应避免继续使用。 Solution preparation 试剂制备 冲洗缓冲液配制（Wash Buffer ）： 根据所需用量，将浓缩的冲洗缓冲液用蒸馏水进行 1 ：20 稀释（例如将 20mL 浓缩缓冲液加入 380mL 蒸馏水 中）。稀释后的缓冲液可在4 ℃冰箱内冷藏 5 周。 Procedure 操作程序 样品的准备 / 萃取 尿液样品： 直接法 1. 将样品在 2000g 加速度下离心 5 分钟。 2. 取上清液 ,用稀释缓冲液对尿液样品进行 5 倍稀释。 ©2010 by Romer Labs Singapore Pte Ltd. All Rights Reserved. This document is the property of Romer Labs Singapore Pte Ltd. PI_COKDA0400_PI_000333_LWA_CN_v01 23 Dec 2010 Page 1 of 4 ® AgraQuant 克伦特罗试剂盒说明书_ Mar2