生活饮用水标准检验方法 微生物指标演示稿.ppt

* * 生活饮用水卫生标准GB5749-2006 生活饮用水标准检验方法GB5750-2006 微生物指标及微生物检验的介绍 广东省CDC微生物检验所 严纪文 我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB5749-85，标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用水标准相比，主要差别在于微生物指标项目少，缺少有机物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠菌群2项，不能确切的评价水质的卫生状况。 修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和隐孢子虫。 同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆菌。 水质常规指标及限值 不得检出 大肠埃希氏菌/（MPN/100mL或CFU/100mL） 在与水接触30min后应不低于0.3mg/L,管梢末水不应低于0.5mg/L 游离余氯 不得检出 耐热大肠菌/（MPN/100mL或CFU/100mL） 每100mL水样中不得检出 粪大肠菌群 不得检出 总大肠菌/（MPN/100mL或CFU/100mL） 每100mL水样中不得检出 总大肠菌群 100 菌落总数/（CFU/mL） 100 CFU/mL 细菌总数 限值 微生物指标 限值 微生物指标 修订后 修订前 水质非常规指标及限值 限值 微生物指标 限值 微生物指标 修订后 修订前 500 菌落总数/（CFU/100mL） - 小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值 限值 微生物指标 限值 微生物指标 修订后 修订前 1 隐孢子虫/（个/10L） - 1 贾第鞭毛虫/（个/10L） - 生活饮用水水质参考指标及限值 0 产气荚膜梭状芽胞杆/（CFU/100mL） - 0 肠球菌/（CFU/100mL） - 限值 微生物指标 限值 微生物指标 修订后 修订前 一、菌落总数 菌落总数 定义：水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数。 36±1℃ 48h 细菌总数 原理：细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1ml水样所含菌落的总数。按本规范规定所得结果只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数 培养条件：36±1℃ 24h 修订后 修订前 二、总大肠菌群（埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属） 除多管发酵法、滤膜法外，增加了酶底物检测方法 多管发酵法 结果：5个10ml 管中阳性管数为0时，MPN值2.2 结果：5个10ml 管中阳性管数为0时，MPN值为0（主要针对出厂自来水或需每天检验一次的水样） 总大肠菌群定义：总大肠菌群指一群在37℃ 培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。 多管发酵法原理：总大肠菌群系指一群在37℃ 培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，具有指示菌的一般特征，故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。 修订后 修订前 滤膜法 滤膜法定义：总大肠菌群滤膜法是指用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳糖的选择培养上, 37℃ 培养24h，能形成特征菌落的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。 培养条件：37℃ 24±2h 滤膜法原理：用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样,细菌被截留在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上,经培养后,计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。 培养条件：37℃ 18-24h 修订后 修订前 酶底物法 酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基：MMO-MUG培养基（Minimal Medium ONPG-MUG）。 本方法可分为定性和定量。 定量法：10管法、51孔定量法 培养条件： 36±1℃ 24h 能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： 可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h 无需确证试验 操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： 检测成本高 总大肠菌群三种方法的比较 较高 低 低 价格 压膜机 显微镜、过滤设备 显微镜 特殊设备 简便 较简便 较繁 步骤 不需要 需要 需要 验证试验 24-28h 24-48h 24-72h 时间 酶底物法 滤膜法 多管发酵法 三、耐热大肠菌群（埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌） 检测方法：多管发酵法、滤膜法 定义：用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群