仙台病毒Tianjin株及其HN/F基因真核表达质粒对人副流感病毒I型的血清中和实验研究.pdfVIP

仙台病毒Tianjin株及其HN/F基因真核表达质粒对人副流感病毒I型的血清中和实验研究.pdf

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第 l6卷3期 天 津 医 科 大 学 学 报 Vol·16,No~ Sep ^1 2010年 9月 JOURNALOFTIANJINMEDICALUNIVERSⅡ.Y . 2010 斗lj 仙台病毒Tianjin株及其HN/F基因真核表达质粒 对人副流感病毒 I型的血清中和实验研究 谌志筠,王 芳,李晓眠 (天津医科大学微生物学教研室,天津 300070) [摘要]目的:探讨仙台病毒Tianjin株(SeV)及其核酸制备预防人副流感病毒 I型(hPIV一1)疫苗的可行性。方法:f1)用 SeV免疫小鼠3次后取血清,间接ELISA法检测免疫血清抗体效价。(2)将倍比稀释的免疫血清与 100TCID~O/.1ml 的hPIV~1进行中和实验 ,观察细胞病变(CPE)并计算50%血清中和终点。(3)构建 SeV真核表达质粒 pVAX1一F、 pVAX1一HN,分别单独或联合免疫小鼠,取免疫血清检测对hPIV一1的中和终点。结果:SeV免疫血清抗体的50%中和 终点分别为39.8、12.6、16.0、44.7、25.1;质粒免疫血清抗体的中和作用按pVAX1一HN+pVAX1一F组pVAX1一HN组 pVAX1一F组依次递减。结论:仙台病毒Tianjin株及其 HN基因、F基因真核表达质粒能诱导机体产生抗 hPIV一1抗 体,有可能成为制备预防hPIV一1疫苗的有效毒株。 【关键词]人副流感病毒 I型;仙台病毒TianjiJ株;HN基因;F基因;中和实验 [中图分类号]R373.1 [文献标识码]A [文章编号]1006—8147(2010)03—0413—40 NeutralizationtestsofSendaivirus,strainTianjinanditsHN/F geneeukaryoticexpressionplasmidtohPIV-1 CHENZhi—yun,WANGFang,LIXiao-mian (DepartmentofMicrobiology,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China) ABSTRACT Objective:ToexplorethepotentialityofSendaivirus,strainTianjin (SeV)anditsnucleic acidusedtopreparevaccinesofhumanparainfluenzaviursI(hPIV-1).Methods:(1)Miceof3weeksold wereimmunizedwithSeV for3times.SerawereisolatedandtheSeV-specificantibodiesweretestedby indirectELISA. (2)NeutralizationtestsweredonewiththeimmuneseraandhPIV-1,thenCPEwas observedand50%seurmneutralizationterminationswerecounted.(3)Eukaryoticexpressionplasmid pVAX1-F,pVAX1-HN ofSeVwereconsturcted.Theywereusedincombinationorsingletoimmunemice andseurm neutralizati0nterminationsweretested.Results:50% serum neutralizati0nterminationsofSeV were39.8,12.6,16.0,44.7,25.1,whichofeukar

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