人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制 expression and quality control of the recombinant human serum albumin and interferon-alpha2b fusion protein in pichia pastoris.pdfVIP

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2017-11-19 发布于上海
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人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制 expression and quality control of the recombinant human serum albumin and interferon-alpha2b fusion protein in pichia pastoris.pdf

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人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制 expression and quality control of the recombinant human serum albumin and interferon-alpha2b fusion protein in pichia pastoris

人血清白蛋白和干扰素0【2b融合蛋白在钱凯1，雷楗勇2 关波1，陈蕴2，饶志明“，金坚屹 (1．江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡214122；2．江南大学医药学院，江苏无锡214122) 白。经摇瓶及5L发酵罐条件优化，确定最佳发酵条件。经50L发酵罐工艺放大，发酵产量稳定，可达到350mg／L。离心获得发酵上清液，超滤浓缩10倍，再依次通过Blue 6FF亲和层 Sepharose 6FF离子柱纯化。纯化产品进行SDS—PAGE纯析、PhenylSepharose6FF疏水层析及QSepharose 度检测、SEC—HPLC检测、相对分子质量测定、N端测序、内毒素检测和生物活性检测。筛选获得一株高产茵。优化获得最佳的发酵条件。纯化产品检测(SEC—HPLC)纯度大于95％，相对分子质量为85 EU／mg，符合国家药典的要求。体外生物细胞活性高达1．6x106IU／mg。具有良好的工业应用价值。关键词：干扰素a2b(IFNa2b)，人血清白蛋白(HSA)，毕赤酵母，质量检测，融合蛋白 261．1l 中图分类号：TS 文献标志码：A 文章编号：1673—1689(2012)12—1269—06 and ControloftheRecombinantHumanSerumAlbumin ExpressionQuality inPichia and FusionProtein pastoris Interferon-Alpha2b B01，CHENYun2，RA0 Jian屯 QIANKail，LEI五帆—yo孵，GUAN Zhi-ming*1，JIN of of of Industrial Education，SchoolBiotechnology，JiangnanUniversity， (1．KeyLaboratory Biotechnology，Ministry ofMedicineand Wuxi214122，China；2．School 214122，China) Pharmaceutics，JiangnanUniversity，Wuxi GS115isconstructedwhich recombinanthuman Abstract：The express engineeringpichiapastorios serumalbuminand fusion fermentationconditionsare in interferon—alpha2bprotein．The optimized flaskand5 Lfermentor．The was Blue 6FF