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第四章 酶学 生理生化教研室 马玉涵 第四章 酶学 概述 酶的结构与功能 酶的作用机理 酶促反应动力学 影响酶促反应速度的因素 调节酶类的催化特征与动力学特征 酶的提取、纯化与活力测定 第一节、概述 1.酶的概念 2.酶催化作用的特点 3. 酶的化学本质 4.酶的命名与分类 一、酶的概念 酶是生物体内产生的，具有催化热力学上所允许进行反应的催化剂。 和其他无机催化剂一样： 反应过程中本身不消耗; 不改变反应的平衡点，不改变反应方向; 只改变到达平衡点的速度。 把酶催化的反应称为酶促反应，反应前的物质称为底物，反应后生成的物质称为产物。 二、酶催化作用的特点 1.催化的专一性; 2.催化的高效性; 3.酶活性的可调节性; 4.酶易反应失活; 5.酶促反应条件温和。 1.催化的专一性 铂：催化许多反应，包括有机反应; H+：淀粉、脂肪、蛋白质、蔗糖等; 酶：只作用于结构近似的分子，甚至只催化一种化合物。 1.催化的专一性 1.绝对专一性：有些酶只作用于一种底物，催化一个反应， 而不作用于任何其它物质。 NH2-C-NH2 2NH3 + CO2 2.相对专一性：这类酶对结构相近的一类底物都有作用。 簇（基团）专一性 胰酶：-Lys/Arg-CO-NH- 键专一性 脂酶：R-CO-O-R’/R’-CO-O-R 3.立体异构专一性： NH2 旋光异构专一性。 L-氨基酸氧化酶：L-R-CH-COOH 几何异构专一性。 2.催化的高效性 3.酶活性的可调节性 4.酶易反应失活 5.酶促反应条件温和 三、酶的化学本质 绝大多数的具有催化作用的酶的化学本质都是蛋白质。证据： 水解最终产物为氨基酸； 具有空间结构层次性，凡是能够破坏蛋白质空间结构的理化因素，都能使酶失活； 具有蛋白质相似的两性解离和等电点； 属于胶体； 具有蛋白质类似的颜色反应。 酶的结构成分 单纯酶(simple enzyme)：仅由氨基酸残基构成 结合酶(conjugated enzyme) 几个概念 辅助因子 辅酶 辅基 辅蛋白与辅助因子作用不同，辅蛋白决定反应的专一性和高效性，辅助因子决定反应的类型。 单体酶、寡聚酶、多酶体系 单体酶(monomeric enzyme)： 由单条肽链构成，仅具有三级结构的酶。 寡聚酶(oligomeric enzyme)： 由多个相同或不同亚基以非共价键连接组成的酶。 多酶体系（multienzyme system)： 由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物。 多酶体系 习惯命名法 1. 一般采用底物而命名：如蛋白水解酶等；对水解酶类，只要底物名称即可，如蔗糖酶、胆碱酯酶、蛋白酶等。 2. 依据其催化反应的性质来命名：如水解酶、转氨酶等。 3. 结合1、2的命名：如琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、磷酸己糖异构酶等。 4. 有时在底物名称前冠以酶的来源或其他特点：如血清谷氨酸－丙酮酸转氨酶、唾液淀粉酶、碱性磷酸酯酶和酸性磷酸酯酶等。 习惯命名法简单，应用历史长，但缺乏系统性，有时出现一酶数名或一名数酶的现象。 系统命名法 EC:2.2.1.1(己糖激酶) EC ---- enzyme commission 2. ---- 类 （转移酶类） 2. ---- 亚类 1. ---- 亚-亚类 1. ---- 亚-亚类中的排序 第二节 酶的结构与功能 酶的活性中心 酶原和酶原激活 活性中心内的必需基团 第三节 酶的作用机制 酶与底物结合形成中间复合物 邻近定向效应 酸碱催化 共价催化 表面微环境效应 诱导契合学说 诱导契合学说 邻近定向效应 共价催化 共价催化（亲核催化, 亲电子催化）：通过催化剂与底物的共价键结合，形成过渡态来加速反应。共价催化具有亲核、亲电过程。 亲核催化：分别带有多电子的原子如O、S和N，可以提供电子去攻击底物上相对带正电子的原子（如羰基碳），即所谓的亲核攻击。 亲电催化：是由亲电试剂(具有接受电子对的原子)引起的催化反应,是亲核催化的反过程． 第四节 酶促反应动力学 无机反应： A→P v=K[S] A+B→P+Q v=K[S1][S2] 酶促反应？ 米－曼氏方程式 中间产物 Km与Vmax的意义 Km值 ① Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 ② 意义： a) Km是酶的特征性常数之一；