玻璃珠破碎毕赤酵母条件的优化.PDFVIP

第 １４卷第 １期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１４ Ｎｏ１ ２０１６年１月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｊａｎ２０１６ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１６０１００６ 玻璃珠破碎毕赤酵母条件的优化 卢俊文，傅梦月，张建国 （上海理工大学 食品科学与工程研究所，上海 ２０００９３） 摘　 要：以毕赤酵母的醇氧化酶（ＡＯＸ）为指标，以玻璃珠破碎法为对象，建立一种简单易行的毕赤酵母细胞的破碎 工艺。 考察玻璃珠用量、振荡时间、细胞液体积对毕赤酵母释放醇氧化酶的影响，进而利用Ｂｏｘ Ｂｅｈｎｋｅｎ设计组合 优化这３种因素，以响应面模型和一个２阶多项式方程拟合了这３种影响因素和醇氧化酶比酶活的关系。 结果表 明：玻璃珠破碎毕赤酵母的最佳条件为０２３ ｇ玻璃珠、１０４ ｍＬ细胞液、１０３ ｓ振荡时间。 在最佳破碎条件下，醇氧 化酶比酶活为８８６ Ｕ／ ｍｇ。 确定了玻璃珠破碎毕赤酵母细胞的条件，而且操作简便，可以同时处理多个样品，为重 组毕赤酵母的筛选提供了有效方法。 关键词：毕赤酵母；玻璃珠；破碎；醇氧化酶；响应面优化 － － － 中图分类号：Ｑ８１９　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１６）０１ ００３０ ０６ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ ｌｙｓｉｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｇｌａｓｓ ｂｅａｄｓ ＬＵＪｕｎｗｅｎ，ＦＵ Ｍｅｎｇｙｕｅ，ＺＨＡＮＧＪｉａｎｇｕｏ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｈａｎｇｈａｉ ｆｏｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｌｙｚｅ ｔｈｅ Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ａｌｃｏｈｏｌ ｏｘｉｄａｓｅ，ｗｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｔｈｅ ｌｙｓｉｓ ｐｒｏｃｅｓｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｇｌａｓｓ ｂｅａｄｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｐａｒａｉｍｅｔｅｒｓ ｏｆ ｇｌａｓｓ ｂｅａｄｓ，ｖｅｒｔｅｘ ｔｉｍｅ，ａｎｄ ｃｅｌｌ ｖｏｌｕｍｅ，ｂｙ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ． Ｂｏｘ⁃Ｂｅｈｎｋｅｎ ｄｅｓｉｇｎ ｗａｓ ｄｏｎｅ ｗｉｔｈ ｔｈｒｅｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｈｒｅｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｕｓｉｎｇ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｃｏｈｏｌ ｏｘｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｓｒｅｓｐｏｎｓｅ． Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｃｏｈｏｌ ｏｘｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄｔｈｅｔｈｒｅｅｆａｃｔｏｒｓｗａｓａｓｅｃｏｎｄ⁃ｏｒｄｅｒｐｏｌｙｎｏｍｉａｌｅｑｕａｔｉｏｎ．Ｔｈｉｓｍｏｄｅｌｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙ ＡＮＯＶＡ，ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｅｄ ｂｙ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ ｌｙｓｉｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｖｏｒｔｅｘ ｔｉｍｅ １０３ ｓ， ｇｌａｓｓ ｂｅａｄｓ０２３ ｇ，ｃｅｌｌ ｖｏｌｕｍｅ １．０４ ｍＬ，ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ８．８６ Ｕ／ ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｃｏｈｏｌ