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肿瘤干细胞的研究及进展 * * Seminar-I 林炳承 研究员 导师： 黄淮青 2003级 报告人： 肿瘤干细胞研究的意义 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 中国卫生部最近公布的《中国癌症预防与控制规划纲要》中指出，目前中国死于癌症的人数每年大约是140~150万，每年发病的人数是180~200万。而且这个数据还在持续上升 。 反对法而 干细胞 分化细胞 干细胞 1、具有自我更新能力; 2、能够广泛增殖; 3、具有分化成多种特定类型细胞的能力. 一、研究背景 干细胞 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 肿瘤干细胞 1. 自我更新能力和不定分化潜能 2. 相似的细胞表面标志 3. 一些相同的细胞信号调节通路 (如Notch, Wnt, BMⅡ信号通路等) 与干细胞具有一定的相似之处，例如： 肿瘤干细胞的发现 1. Nature,1963,199 : 79-80 Bruce等人发现，由小鼠腹水分离得到骨髓瘤细胞，其中的极少部分（0.01%~1%）可在体外培养实验中形成集落。 2. Science,1977,3:730-737 Hamburger等人发现，在人肺癌、卵巢癌、神经母细胞瘤等肿瘤细胞的体外培养实验中，仅有0.1%可形成集落。 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 具有形成集落的能力 x 随机学说(Stochastic) 所有肿瘤细胞均存在无限增殖的可能； 但以很小的几率,随机地进入细胞周期增生分裂 等级学说(Hierarchy) 肿瘤细胞在功能上是异质的； 只有少量肿瘤干细胞具有无限增殖的可能 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 二、肿瘤干细胞的研究 2.1 肿瘤的形成假说 3. Ｄick J. E., Proc Natl Acad Sci USA 100 (2003) 3547. 白血病干细胞的研究 CD34+CD38-为急性髓系白血病肿瘤干细胞的特异表面标志,在每一病人的所有血细胞中只占0.2%~1% CD34- CD34+CD38- CD34+CD38+ 2.2 等级学说的实验证明 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 4. Bonnet D., Dick J. E., et al., NatMed. 3 (1997) 730. ESA+CD44+CD24-/low的乳腺癌细胞可以在免疫缺陷小鼠体内生长， 而ESA-CD44-CD24+ /low细胞却不能. 实体瘤干细胞的证实——乳腺癌 2.2 等级学说的实验证明 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 5. Al-Hajj M., et al., Proc Natl Acad Sci USA. 100 (2003) 3985. CD133+ CD133- CD133+ 肿瘤细胞（100个）移植到免疫缺陷小鼠脑组织后形成肿瘤 CD133-肿瘤细胞（105个）不能形成肿瘤 实体瘤干细胞的证实——脑肿瘤 2.2 等级学说的实验证明 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 6. Sheila K. S., et al., Nature 432 (2004) 396. 流式细胞仪（FACS） 免疫磁珠分离（MACS） 免疫法 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 2.3 肿瘤干细胞的分离纯化 干细胞高表达抗药蛋白1 (BCRP1)能够将药物泵出细胞外的特性,用荧光染料Hoechest 33342对肿瘤细胞进行预染,然后用流式细胞仪进行分选 旁群细胞 干细胞 染色法 Seminar-I 肿瘤干细胞的研究及进展 7. Setoguchi T., et al., Cell cycle 3 (2004) 414. 2.3 肿瘤干细胞的分离纯化