银杏叶片RNA提取方法的研究.PDFVIP

中国农学通报 2011,27(19):23-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 银杏叶片RNA提取方法的研究 尤 超，赵大球，梁乘榜，周春华 （扬州大学园艺与植物保护学院，江苏扬州225009 ） 摘 要：为了获得一种银杏（Ginkgo biloba L. ）叶片总RNA 提取的理想方法，为后续的分子生物学研究打 下基础，笔者以不同生长期的叶片为材料，利用生物分光光度计和凝胶电泳法比较了改良CTAB 法、乙 二醇丁醚法以及改良Trizol 法提取的银杏总RNA 的产率和纯度。结果表明：改良Trizol 法所提取RNA 的OD260/OD280 比值介于1.8~2.0 之间，并且OD260/OD230 在1.9~2.1之间，具有较高的纯度。凝胶电泳结果表 明，改良Trizol 法有28S rRNA 和18S rRNA 2 条清晰的条带，且很少有降解；CTAB 法获得的RNA 品质也 较好，但存在降解和弥散现象，乙二醇丁醚法提取效果较差。这表明改良Trizol 法提取的总RNA 具有 很高的纯度，可以满足进一步分子生物学研究的要求。 关键词：银杏；RNA ；提取方法 中图分类号：S661.1 文献标志码：A 论文编号：2011-0328 ComparisonofMethodsforTotalRNAExtractionfromGinkgobilobaL. YouChao,ZhaoDaqiu,LiangChengbang,ZhouChunhua (College of Horticulture and Plant Protection, Yangzhou University,YangzhouJiangsu225009) Abstract:InordertoobtainanidealtotalRNAextractionmethodofGinkgobilobaL.providingfoundationfor molecularbiologyresearch,totalRNAfromleavesatdifferentgrowthstageswereextractedwiththreemethods, includingCTABmethod,ethyleneglycolmonobutylethermethodandamodifiedTrizolmethod,anditsquality andquantitywerecompared.TheresultsindicatedthatthemodifiedTrizolmethodwasbetterthantheother methodssincethevalueofOD260/OD280 andOD260/OD230 were 1.8-2.0and 1.9-2.1,thepuritieswerehigher,the bandsof28Sand 18SrRNAongelelectrophoresiswereveryclearanddidnotdegradated.Comparably,CTAB methodwasnotverygoodasthefirstmethodbecauseRNAwaseasydegradedanddispersedalthoughthe valuewashigher,andethyleneglycolmonobutylethermethodwasnotfittherequirementofRNAextraction. Keywords:GinkgobilobaL.;RNA;extractionmethod 0 引言 银杏（Ginkgo biloba L. ）又名白果树、公孙树，是中 在植物分子生物学的研究中，植物器官组织RNA 国原产