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靶向Livin基因的microRNA干扰对人卵巢癌顺铂耐药细胞的体外影响.doc
靶向Livin基因的microRNA干扰对人卵巢癌顺铂耐药
细胞的体外影响
马彩婷1 张辉2 薛新建3 (河北医科大学 硕士研究生1 张辉:河北医科大学第四医院 妇科 博士 通讯作者2河北医科大学 硕士研究生3)
[摘 要] 目的 研究靶向Livin的microRNA干扰对人卵巢癌顺铂耐药细胞的体外影响,探讨Livin与SKOV3/CDDP细胞顺铂耐药性的关系。方法 利用RT-PCR技术,检测Livin基因在卵巢癌亲本和耐药细胞中的表达水平。通过micro RNA干扰沉默SKOV3/CDDP细胞中Livin基因,利用RT-PCR方法检测Livin在异性转染组、非特异性转染组和对照组细胞中的表达;采用MTT、FCM方法测定转染后后耐药细胞在顺铂作用下细胞增殖及凋亡的变化。 结果 Livin基因在耐药细胞中的表达高于亲本细胞(p0.05);通过MTT法检测耐药细胞在浓度分别为1μg/ml、5μg/ml和10μg/ml的顺铂在作用12h,24h,48h下的,特异性转染组细胞的增殖能力均较其它两组高,(p0.05);FCW检测显示,1μg/ml的顺铂作用24h后,特异性转染组细胞凋亡指数明显高于其它两组(p0.05)。 结论 Livin基因可能参与卵巢癌细胞顺铂耐药,靶向Livin基因microRNA干扰有可能够逆转卵巢癌顺铂耐药细胞的耐药性。
[关键词] 卵巢癌;Livin;microRNA;耐药
[中国图书馆分类法]:R711.75 [文献标识码] A
The effect of micro RNA interference target Livin on chemosensitivity of SKOV3/CDDP cells to CDDP in vitro
Ma Caiting1, Zhang Hui2, Xue Xinjian3 (Hebei medical university Master1
Hebei medical university the forth hospital Department of gynecology2 Hebei medical university Master3)
[Abstract] Objective: To transfect human ovarian carcinoma drug-resistance cells with micro RNA against Livin , study the effect of down regulation of Livin on cisplatin resistance of human ovarian carcinoma drug-resistance cells. To investigate the relationship between Livin and CDDP resistance in SKOV3/CDDP cells Methods: Detect the expression in SKOV-3 and SKOV3/CDDPcells by RT – PCR. Transfect the SKOV3/CDDP cells with micro RNA against Livin, Divide the SKOV3/CDDP cells into three group :the control group,the non-specific transfect group and the specific transfect group,and assessed the proliferation activity and the apoptosis ratio of SKOV3-CDDP cells by MTT experiment and flow cytometry before and after transfection. Results: the expression of Livin mRNA in SKOV3/CDDP cells is higher than in SKOV- 3 cells(p0.05). C the reproductive activity of the specific transfect group was lowest after been exposed to1ug/ml、 5ug/ml 、10ug/ml concentration of CDDP for 12h,24h,48h. (p0.05) The ratio of apoptosis of the specific transfect group wa
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