01-2 实验器材的清洗包装消毒-韩鹏.pptVIP

实验器材的清洗、包装和消毒 细胞培养常用实验器材 二、塑料器材 多孔培养板 培养皿 培养瓶 离心管 针头式加压塑料小滤器 三、橡皮器材 橡皮制品(最好是硅制品)主要是各种瓶或试管的塞子、盖子。 四、金属器材 剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头等 五、其他物品 纱布 注射器和针头 [原理] 清洗与消毒是细胞培养实验的第一步，是细胞培养中工作量最大，也是最基本的步骤。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞养不好与清洗不彻底有很大关系。清洗后的玻璃器皿，不仅要求干净透明、无油迹，而且不能残留任何物质。如果有毒的化学物质，哪怕残留0.1微克，也可能影响细胞生长。灭菌手段的选择十分重要，对不同的物品需采用不同的灭菌方法。假如选用的方法不对，即使达到了无菌却使被灭菌药品丧失了营养价值、生物学特性或其他使用价值也不行。以下在每种灭菌步骤中都介绍其使用范围。 [实验目的] 能独立的进行用于细胞培养的各种器皿的清洗、包装与消毒，掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和过滤除菌法的操作，了解化学消毒法的使用方法。 一、实验器材的清洗 (一)操作方法 1. 清洗液（酸液）的配制方法 2. 物品的清洗 (1). 新购置物品玻璃器皿清洗步骤 (2). 使用过的玻璃器皿清洗步骤 (3). 橡皮制品的清洗 (4). 塑料制品的清洗 (5). 金属制品的清洗 (二)清洗注意事项和要求 (一)操作方法 1. 清洁液（酸液）的配制方法 2. 物品的清洗 (1) 新购置物品玻璃器皿清洗步骤 清水浸泡半小时以上→简单刷洗→5%的稀盐酸浸泡过夜→自来水冲洗→在洗涤剂中反复刷洗→自来水中充分冲洗→凉干（或50℃烤干）→浸入清洁液中（俗称泡酸）过夜→流水振荡冲洗20遍→漓水→去离子水冲洗3～4次或浸泡2次（每次24小时）→三蒸水冲洗两次（或浸泡一次）→50℃烤干，待包装。 (2) 使用过的玻璃器皿清洗步骤 ①毒玻璃器材用后应立即浸入消毒水中，非带毒的玻璃器材需浸入清水中浸泡→刷洗→自来水冲洗→凉干（50℃烤干） ②浸入清洁液中（俗称浸酸）不低于6小时或过夜→流水振荡冲洗20遍→漓水→去离子水冲洗3～4次或浸泡2次（每次24小时）→三蒸水冲洗两次（或浸泡一次）→50℃烤干，待包装。 注意： ② 步骤中：a. 用洗涤液（中性），最好不用洗衣粉（碱性）； b.毛刷刷洗，每个角落20下 (3) 橡皮制品的清洗 新购置的橡胶制品（大小胶塞、橡皮胶头）的洗涤方法如下： 2%NaOH煮沸15分钟→流水冲洗→2～5%稀HCl煮沸15分钟→流水冲洗→去离子水煮沸20分钟（或去离子水浸泡过夜）→去离子水冲洗一次→三蒸水煮沸20分钟→三蒸水冲洗一次→50℃烤干备用 旧胶塞不必用酸碱处理可直接用洗涤剂煮沸和清洗数次，过蒸馏水，晾干，包装并高压灭菌后，便可使用。 (4) 塑料制品（不耐强酸、不耐热） 用后立即用流水冲洗→浸于自来水中过夜→用纱布或棉签沾洗涤剂刷洗→流水冲洗→晾干→浸于清洁液（次强酸液）中浸泡2-6h→流水冲洗20遍→蒸馏水冲洗3次或浸泡24小时→晾干→（浸泡在75%酒精中备用→临用前从75%酒精中取出→）在超净台内紫外线照射1h左右方可使用。也可在洗净后不经70%乙醇浸泡，而用塑料袋包好，成箱地去照射60Co灭菌。 注射器薄膜滤器刷洗前先将上、下两部分分开，按上述方法清洗晾干后将纤维薄膜滤片夹在中间（光面向下）拧紧上下两部分，备用。 (5) 金属制品的清洗 不锈钢除菌滤器的清洗 先用洗涤剂刷洗滤器→流水冲洗→去离子水冲洗2～3次（去离子水浸泡24小时）→三蒸水冲洗2～3次或浸泡24小时→干燥。 镊子、剪刀、手术刀、解剖刀（刀片）（专用、不混用）等的清洗 纱布擦去脏污→自来水洗净→酒精棉球擦试。 注：新的金属器材的消毒处理方法--纸擦去表面的油脂-洗衣粉煮沸，或用1%碳酸氢钠煮沸15分钟-水洗-95%酒精纱布擦干-包装灭菌 (二)清洗注意事项和要求 1. 使用后的实验器材应立即投入清水中。带毒的玻璃器皿需先浸泡在5％来苏儿或1％盐酸溶液中（依病毒的种类而定）1天以上或高压灭菌。 2. 浸泡、煮沸、酸泡的器皿内要充满液体，不得有气泡。 3. 煮沸前的水面要高于器材5厘米，水沸后投入洗涤剂；若洗涤剂和实验器材同时从冷水煮至沸腾或使用过量洗剂均易腐蚀玻璃表面，使玻璃碱化pH值上升。 4. 软毛刷的刷端已掉毛的应该弃去，否则会损害玻璃。玻璃划痕处易残留洗涤剂,会改变培养液瓶pH和毒害细胞。 (二)清洗注意事项和要求 5. 浸泡器材的蒸馏水容器要专用，并做好标记，如