《动物生物化学实验技术》葡聚糖凝胶层析技术.pptVIP

引 言 层析法也称色谱法，是1906年俄国植物学家Michael等发现并命名的。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱子，各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开，由此得名为“色谱法”（Chromatography) 。后来无色物质也可利用吸附柱层析分离。1944年出现纸层析， 以后层析法不断发展，相继出现气相层析、高压液相层析、薄层层析、亲和层析、凝胶层析等。 凡盐析所获得的粗制蛋白质（如盐析得到的IgG）中均含有硫酸铵等盐类，将影响以后的纯化，所以纯化前均应除去，此过程称为“脱盐”（desalthing）。脱盐常用透析法和凝胶过滤法。  一、实验目的 （1）掌握葡聚糖凝胶柱层析法脱盐分离蛋白质的原理 （2）学会葡聚糖凝胶柱层析法脱盐和分离蛋白质实验操作技术 二、基本原理 当生物大分子通过装有凝胶颗粒的层析柱时，根据它们分子大小不同而进行分离的技术。  凝胶层析（gel chromatography）又称为凝胶过滤（gel filtration）、分子筛过滤（molecular sieve filtration） 等。它是20世纪60年代发展起来的一种层析技术。其基本原理是利用被分离物质分子大小不