发酵无菌技术课件.ppt

(4)空气贮罐 作用：是消除压缩机排出空气量的脉动，维持稳定的空气压力，同时也可以利用重力沉降作用分离部分油雾。 贮罐的大小可按下面的经验公式计算： (5)空气冷却器 空气压缩机出口温度高，必须冷却。冷却还可除湿。 常用的空气冷却器有： 立式列管式热交换器 沉浸式热交换器 喷淋式热交换器 (6)气液分离器 冷却后的压缩空气含油滴和水滴需分离出去来保护过滤介质。 常用的气液分离器有： 旋风式：旋风分离器 填料式：丝网除沫器 大肠杆菌在不同温度下 的残留曲线 嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢在不同温度下的死亡曲线 影响培养基灭菌的其它因素 培养基成分 油脂、糖类及一定浓度的蛋白质、高浓度有机物等增加微生物的耐热性 低浓度（1%-2%）NaCl对微生物有保护作用，随着浓度增加，保护作用减弱，当浓度达8%-10%以上，则减弱微生物的耐热性。 pH：pH6.0-8.0，微生物最耐热，pH6.0，H+易渗入微生物细胞内，改变细胞的生理反应促使其死亡。∴培养基pH愈低，灭菌所需时间愈短。 培养基的物理状态：固体时间大于液体 泡沫：泡沫中的空气形成隔热层，对灭菌极为不利，可加入少量消泡剂 。 培养基中的微生物数量：数量多，时间长。 影响培养基灭菌的其它因素 将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程，也称实罐灭菌。 二、分批灭菌 分空气过滤器灭菌 并用空气吹干 夹套或蛇管排冷水，开启排气管阀，空气管通蒸汽，也可夹套内通蒸汽 达70℃左右 取样管 放料管 通蒸汽 120℃，1×105pa 保温 保温阶段，凡液面以下各管道都应通蒸汽，液面上其余各管道则应排蒸汽，不留死角，维持压力、温度恒定 罐压接近空气压力 向罐内通无菌空气 保温结束，依次关闭各排汽、进汽阀门 夹套或蛇管中通冷水 培养基降温到所需温度 1.灭菌工艺过程 240 160 120 80 时间（min) 0 50 100 150 温度 升温 冷却 保温 培养基分批灭菌过程中的温度变化情况 2、过程包括： 升温、保温和冷却三阶段。 各阶段对灭菌的贡献： 20%、75%、5%。 三、连续灭菌（又称连消） 将配制好的培养基向发酵罐等培养装置输送的 同时进行加热、保温和冷却等灭菌操作过程。 喷淋冷却连续灭菌流程 喷射加热连续灭菌流程 薄板式换热器连续灭菌流程 发酵罐 蒸汽 原料 冷却水 无菌培养基 配料罐 泵 加热塔 （连消塔） 维持罐 冷却管 1、灭菌工艺流程 喷淋冷却连续灭菌流程 连续灭菌的流程与设备 1、配料预热罐：将配制好的料液预热到70?90℃ ，以免连续灭菌时料液与蒸汽温度相差过大而产生水汽撞击及时间长导致冷凝水过多； 2、连消塔：用高温蒸汽使料液温度很快升高到灭菌温度（110?130℃，20 ? 30S）； 3、维持罐：使料液在灭菌温度下保持8～25min。因为：连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的灭菌是不够的； 4、冷却罐：使料液冷却到40 ? 50°C后（冷水喷淋） ，输送到预先灭菌过的罐内。 喷淋冷却器 结构简单；广泛使用 板式换热器 体积小，换热效率高；但流动阻力较大 板式换热器 板式换热器 板式换热器原理图 2、分批灭菌与连续灭菌的比较 连续灭菌的优点：（适用于大型罐） 可采用高温短时灭菌，营养成分破坏少，有利于提高发酵产率； 发酵罐利用率高； 蒸汽负荷均衡； 采用板式换热器时，可节约大量能量； 适宜采用自动控制，劳动强度小； 可实现将耐热性物料和不耐热性物料在不同温度下分开灭菌，减少营养成分的破坏。 缺点： 对小型罐无优势，不方便，对设备要求高； 蒸汽波动时灭菌不彻底； 当培养基中含有固体颗粒或有较多泡沫时，以分批灭菌好，防止灭菌不彻底。 分批灭菌与连续灭菌的比较 优 点 缺 点 连续 灭菌 1.高温短时灭菌，培养基 营养成分损失少。 2.发酵罐占用时间缩短， 利用率高。? 1.设备复杂，操作麻烦, 染菌机会多。 2.不适合含大量固体物 料的灭菌。 间歇 灭菌 1.设备要求低，不需另外 加热、冷却装置。 2.操作要求低，适合小批 量生产规模 3.适合含大量固体物料的 灭菌 1.培养基的营养物质损 失大，灭菌后培养基 质量下降 2.发酵罐的利用率较低 3.不适合大规模生产的 灭菌 分批灭菌与连续灭菌的比较 1、种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等的空罐灭菌及管道灭菌: 　 从有关管道通入蒸汽，使罐内蒸汽压力达0.147MPa，维持45min，灭菌过程中，从所有液位以上的阀门、边阀排出空气，并使蒸汽通过这些阀门以防止出现死角。灭菌完毕后，关闭蒸汽，待罐内压力低于空气过滤器压力时，通入无菌空气保压0.098