糖氮测定方法及曲线表.docVIP

1 总糖样品检测 过程：吸管吸取均匀原样或离心上清液2.5ml于50ml刻度试管中，加入6.0mol/L盐酸3ml于上述50ml刻度试管中，轻轻摇匀，置沸水浴中加热水解20min,取出冷却，加纯化水（蒸馏）至刻度摇匀，取出1.0ml于容量约100ml的试管中，加入斐林混合试剂15ml充分摇匀，在沸水浴中加热10min,取出冷却，加入6mol/L盐酸4ml轻轻摇匀，用0.1000mol/L硫代硫酸钠滴定至接近终点时（淡黄色），加入0.5％（g/ml）淀粉指示剂1ml摇匀，继续滴定至蓝色消失为终点，读取硫代硫酸钠的滴定毫升数（VNa2S2O3样）。 空白检测：于容量约100ml的试管中，加入斐林试剂15ml充分摇匀，在沸水浴中加热10min，取出冷却，加入6mol/L盐酸4ml轻轻摇匀，用0.1000mol/L硫代硫酸钠滴定至接近终点时（淡黄色），加入0.5％（g/ml）淀粉指示剂1ml摇匀，继续滴定至蓝色消失为终点，读取硫代硫酸钠的滴定毫升数（VNa2S2O3白）。 计算 糖％（g/ml） ＝ VNa2S2O3白- VNa2S2O3样 查表 2.5× 2 50 ＝ 查表值 技术标准 测定误差±0.5％（g/ml） 2 还原糖样品检测： 过程：吸取滤液或离心上清液1.0ml于容量约100ml的试管中，加斐林试剂15ml充分摇匀，在沸水浴中加热10min,取出冷却，加入6mol/L盐酸4ml轻轻摇匀，用0.1000mol/L硫代硫酸钠滴定至接近终点时（淡黄色），加入0.5％（g/ml）淀粉指示剂1ml摇匀，继续滴定至蓝色消失为终点，读取硫代硫酸钠的滴定毫升数（VNa2S2O3样）。 空白检测： 于容量约100ml的试管中，加入斐林试剂15ml充分摇匀，在沸水浴中加热10min，取出冷却，加入6mol/L盐酸4ml轻轻摇匀，用0.1000mol/L硫代硫酸纳滴定至接近终点时（淡黄色），加入0.5％（g/ml）淀粉指示剂1ml摇匀，继续滴定至蓝色消失为终点，读取硫代硫酸钠的滴定毫升数（VNa2S2O3白）。 结果计算 还原糖％（g/ml）＝（VNa2S2O3白- VNa2S2O3样）查表 ＝ 查表值/10 技术标准 测定误差±0.05％（g/ml） 3 氨（胺）氮检测 测定步骤 样品：吸取滤液或离心上清液2ml于250ml三角瓶中，加入“三合一”混合指示剂50ml摇匀。放置2min后，用0.02857mol/L氢氧化钠调至橙黄色，加入18％（g/ml）中性甲醛5ml，（氮在0.3％以上样品加10ml甲醛）摇匀，放置5min,用0.02857mol/L氢氧化钠氢氧化钠滴至橙红色为终点，记录VNaOH样。 空白：于250ml三角瓶中，加入“三合一”混合指示剂50ml摇匀。放置2min后，用0.02857mol/L氢氧化钠调至橙黄色，加入18％（g/ml）中性甲醛5ml， （氮在0.3％以上样品加10ml甲醛）摇匀，放置5min,用0.02857mol/L氢氧化钠氢氧化钠滴至橙红色为终点，记录VNaOH白。 结果计算 氮％（g/ml）＝ CV×0.014 ×100 吸取毫升数 ＝ 0.02857mol/L×(VNaOH样-VNaOH白) ×0.014 ×100 2 ＝ 0.02(VNaOH样-VNaOH白) VNaOH（样）——样品消耗氢氧化钠标准液的体积（ml） VNaOH（白）——空白消耗氢氧化钠标准液的体积（ml） 0.02857mol/L——氢氧化钠摩尔浓度 0.014——氮的毫摩尔质量 2ml——吸样毫升数 与糖氮有关的试剂配制及标化 1 斐林A-30%(g/ml)CuSO4 1.1 配制 称取分析纯含五个结晶水的硫酸铜150g，（若为无水硫酸铜应称96g）,于搪瓷杯中加纯化水约300ml，加热并不断搅拌使其溶解，用中速滤纸过滤，加浓硫酸0.5ml，加纯化水至500ml摇匀，放置一天后标化。 1.2 标化 用一等2ml吸管吸取2.0ml斐林A于250ml碘瓶中，加50ml纯化水，加30％碘化钾5ml,摇匀，再加2ml冰醋酸，摇匀，封水，在暗处放置3min，用0.1000mol/LNa2S2O3滴定，被滴定液成为淡黄色时，加入0.5％（g/ml）淀粉指示剂1ml，滴至蓝色消失为终点，并将计算后的浓度结果记录在试剂配制记录上。 1.3 计算： C·V×0.2497×100 CuSO4％（g/ml）＝ 2.0 注：C——硫代硫酸钠的摩尔浓度 V——消耗硫代硫酸