乌贼墨诱生小鼠IFN-γ及调节LAK细胞活性的-免疫学专业毕业论文.pdfVIP

/ 了 材料与方法 味 6 0 只小鼠，分6组，每组10只，其中5组为实验组，另一组 为对照组。实验组小鼠每天灌胃5%浓度乌贼墨0.5ml，每天一 次，连续5天。对照组小鼠用同样方式给予等量生理盐水。分别 于灌胃后第24,48,72,96,120h采血，分离血清。用ELISA法定量 侧定5个不同时段和对照组小鼠血清中的IFN一，产生水平。并 且，用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测IL一2诱导的LAK细胞体外 杀伤肿瘤细胞活性。 实验结果 1.乌贼墨对小鼠血清中IFN一，产生的影响 应用ELISA法检测经乌贼墨处理的小鼠血清中EM一Y水平 变化IFN一y的产生于末次乌贼墨灌胃后第24h(212.04t58. 55pg/ml)后开始升高，48h达到高峰(422.17t40.23pg/ml),72h (220.73土52.66pg/ml)则降至正常水平，对照组小鼠血清中IFN 一7水平为225.7t50.45pg/mlo48h组小鼠血清中IFN一，水平 和对照组小鼠比较显著增高(P0.01), 2.乌贼墨对小鼠LAK细胞体外杀伤活性的影响 经乌贼墨处理后的第48h组小鼠的LAK细胞对靶细胞的体 外杀伤率为(28.8士6.4)%，对照组小鼠的LAK细胞对靶细胞的 体外杀伤率为(10.7土2.3)%，取两组的体外杀伤率做t检验，差 异显著(P0.01)。 讨 论 在利用免疫应答原理和免疫学方法杀伤肿瘤的研究中，已经 逐步发现了众多免疫治疗因子。通过其作用于宿主免疫系统，诱 发或增强抗肿瘤免疫应答，以达到消灭肿瘤或延缓肿瘤生长的目 ·2 · 的。这些治疗因子可以是肿瘤特异性的，也可以是非特异性的。 随着在海洋生物中不断发现并提取到重要的可用于肿瘤免疫治疗 的治疗因子，乌贼墨由于已被证实含有高效抗肿瘤活性物质而逐 渐受到关注。 在以往研究基础上，我们在本次研究中又进一步观察了经口 服乌贼墨刺激后，对小鼠血清中干扰素一袱IFN一，)的产生水平 和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)体外杀伤活性的影响。结果 表明，经乌贼墨处理的小鼠血清中IFN一y水平显著提高。小鼠 血清中IFN-y水平的提高在一定程度上支持了以往有关乌贼墨 及其提取物能够激活免疫活性细胞和调节细胞因子产生的研究结 论，也可提示其可能在抗肿瘤免疫应答中发挥重要作用。研究表 明，LAK细胞可以溶解各种类型的肿瘤细胞，是非特异性的肿瘤 杀伤细胞。在本研究中，经乌贼墨处理后的小鼠LAK细胞对靶细 胞的体外杀伤活性较对照组小鼠明显增强，本文中LAK细胞体外 杀伤活性增强的结果，提示可能是乌贼墨促进T细胞活化以及诱 生IFN一，并作用于NK细胞，导致经IL一2诱导后的LAK细胞活 性显著提高。 结合以往研究结论可提示，乌娥墨及其提取物所表现出的抗 肿瘤活性是其促进各种免疫效应机制综合后的总结果。众所周 知，细胞因子并不是孤立存在的，他们之间通过合成分泌的相互调 节，受体表达的相互调控，生物学效应的相互影响而组成细胞因子 网络。通过对这些细胞因子的深人研究，可以帮助了解某些免疫 活性细胞在乌贼墨表达抗肿瘤活性过程中所发挥的作用。因而， 有助于发现并解释目前尚未了解的一些机制间题。 迄今为止，在已证实乌贼墨及其提取物具有显著免疫功能增 强作用的同时，尚未发现对机体有任何毒副作用。并且，乌贼墨来 源丰富，价格低廉，其天然活性成分物理性状稳定，分离工艺相对 简单。因此，乌贼墨的提取物可以添加到多种食品中，有可能作为 ·3 · 一一 .一 ， .一 理想的保健食品而广泛应用。 结 论 : 经乌贼墨灌胃处理后的小鼠，在一定时间内血清中可产生较 高水平的细胞因子IFN一Y。并且，rIL一2所诱导的LAK细胞体 外的肿瘤杀伤活性明显增强。本实验的结果表明，乌贼墨能够诱 导小鼠的细胞免疫功能出现上调，促进机体多种抗肿瘤免疫机制 协同发挥远胜鱼韭里o 关键词 乌贼墨,IFN